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目的溃疡性结肠炎(UC)的病因和发病机制目前还不十分清楚。近年来,随着对溃疡性结肠炎研究的深入,人们对溃疡性结肠炎发病及治疗有了新的认识,认为不论是肠道的原发性病变,还是继发性损害,均会造成结肠粘膜结构和功能的损伤,肠粘膜损伤与溃疡性结肠炎发病密切相关。肠粘膜不仅是营养物质消化、吸收的重要场所,同时也是致病微生物和毒素侵入的主要门户。生理情况下,机体可通过肠粘膜屏障来有效地阻止致病微生物和毒素的侵入,以保证机体处于健康状态。当肠粘膜屏障损伤时,肠道中的微生物和毒素便可突破肠粘膜屏障,进入门静脉和淋巴系统引起细菌移位,甚至发展为溃疡性结肠炎。为明确炎性细胞调控因子NF-κB、β-防御素-2、TFF3、EGF及TGF-β1在肠道自我保护和损伤后修复机制中的重要地位,本课题采用高脂高糖饮食加上TNBS灌肠法复制湿热型溃疡性结肠炎大鼠模型,在结肠粘膜损伤方面“寻本溯源”,把研究的重点放在炎性细胞调控因子NF-κB及p-防御素-2上。在肠道修复作用方面,则重点探讨TFF3、EGF、TGF-β1在溃疡性结肠炎发生发展及粘膜修复过程中的变化及相关调节机制。通过观察加味白头翁汤对NF-κB活化及β-防御素-2、TFF3、TGFβ1、EGF表达的影响,进而探讨加味白头翁汤对溃疡性结肠炎肠道损伤修复的作用机理。从而为加味白头翁汤应用于溃疡性结肠炎临床提供理论基础,同时对中医治则治法的现代化研究作有益探讨。方法将40只SPF级健康SD大鼠,雌雄各半,随机分为正常对照组、模型组、柳氮磺胺吡啶组、加味白头翁汤组,每组10只。采用三硝基苯磺酸([NBS)局部灌肠加高脂高糖法建立UC大鼠模型,动物模型制作成功后,中药治疗组给予加味白头翁汤灌胃,西药对照组给予柳氮磺胺吡啶(SASP)灌胃,模型组及正常对照组给予等容积的生理盐水灌胃,每天1次,连用15d。治疗结束后将大鼠固定于鼠解剖台上,腹腔注射20%氨基甲酸乙酯麻醉,剖取整个结肠组织,先行肉眼仔细观察各组大鼠结肠粘膜的充血、水肿、伪膜、溃疡和糜烂数目及面积病理改变情况,然后再取少量结肠粘膜组织石蜡包埋,HE染色,光镜观察大鼠结肠组织病理形态学变化。剩余结肠粘膜标本运用蛋白免疫印迹(Western blot)法检测NF-κB的蛋白表达水平,用Real-time PCR方法测定β-防御素-2、TFF3的基因表达变化,免疫组化法观察TGFβ1、EGF蛋白表达的变化。结果1加味白头翁汤方组与模型组相比较：大鼠的一般情况明显好转,大鼠脓血便和粘液便消失,大便成形,活动灵活,食欲好转,大鼠体重明显增高。加味白头翁汤方可使结肠粘膜组织损伤和病理组织学评分降低,与模型组比较,差异显著(P<0．01)。结肠粘膜组织的充血、水肿、伪膜、溃疡和糜烂数目及面积减少,肠壁损伤修复,炎性细胞浸润减少,溃疡附近肠粘膜可见不连续粘液层覆盖,而粘膜下层则可见胶原纤维增生。2与正常组比较,模型组大鼠NF-KB p65表达显著增高,差异显著(P<0.01)；给予加味白头翁汤治疗后,NF-KB p65表达明显下降,与模型组比较,差异显著(P<0.01)；中药治疗组与西药对照组比较无显著差异(P>0.05)。3与正常组比较,模型组大鼠结肠粘膜β-防御素-2表达显著增高,差异显著(P<0.01)；给予加味白头翁汤治疗后,结肠粘膜β-防御素-2基因表达明显下降,与模型组比较,差异显著(P<0.01),中药治疗组与西药对照组比较无显著差异(P>0.05)。4与正常组比较,模型组大鼠结肠粘膜TFF3略有降低,但没有显著差异(P>0.05)；给予加味白头翁汤治疗后,结肠粘膜TFF3基因表达明显上升,与模型组比较,差异显著(P<0.01)；中药治疗组与西药对照组比较无显著差异(P>0.05)。5与正常组比较,模型组TGF β1的表达明显增高,两组比较差异显著(P<0.01),给予加味白头翁汤治疗后,TGF β1相对表达明显下降,与模型组比较,差异显著(P<0.01),中药治疗组与西药对照组比较无显著差异(P>0.05)。与正常组比较,模型组EGF的表达明显低于正常组,两组比较差异显著(P<0.01)；给予加味白头翁汤治疗后,EGF蛋白相对表达明显增高,与模型组比较,差异显著(P<0.01),中药治疗组与西药对照组比较无显著差异(P>0.05)。结论1加味白头翁汤方可抑制UC的炎性细胞浸润,使炎症减轻,同时还有促进结肠粘膜损伤修复,恢复结肠粘膜的分泌功能的作用。说明本课题UC模型复制成功。加味白头翁汤方可通过减轻结肠炎症,促进结肠粘膜修复,从而起到治疗UC的作用。2NF-KB p65的表达与UC病情严重性和活动性之间有一定关系,提示UC结肠粘膜组织的NF-KB表达水平可反映结肠组织的损害程度,对于病情评估和治疗效果判断可能具有潜在指导意义。加味白头翁汤组对UC大鼠模型过度激活的NF-KB有抑制作用,这可能是加味白头翁汤组治疗UC大鼠的作用机理之一。3加味白头翁汤方的治疗作用可能在于通过下调β-防御素-2基因表达含量,进而减轻结肠粘膜的炎症反应,杀伤肠道病原微生物,起到粘膜修复的作用。β-防御素-2可能是加味白头翁汤治疗UC作用的关键的靶位。4加味白头翁汤方可通过增加结肠上皮细胞TFF3的分泌从而促进受损结肠粘膜组织的修复。5加味白头翁汤对UC大鼠模型结肠粘膜TGF β1蛋白表达有下调作用,从而抑制炎症的发生发展；对UC大鼠EGF的蛋白表达则有上调作用,能够促进受损粘膜周围的完好上皮细胞向损伤粘膜表面迁移覆盖,加快损伤粘膜的修复。