【摘 要】
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研究目的:采用来曲唑联合高脂乳剂建立的多囊卵巢综合征伴胰岛素抵抗（PCOS-IR）的模型大鼠为研究对象,观察桂枝茯苓丸对模型大鼠血清性激素水平和卵巢形态学及胰岛素抵抗以及卵巢颗粒细胞中PI3k/AKT/mTOR信号通路的蛋白表达变化,探索桂枝茯苓丸调控PCOS-IR大鼠排卵障碍的作用机制,从而为此方改善PCOS排卵障碍提供一定的科学依据。研究方法:6周龄Sprague-Dawley雌性健康大鼠72
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研究目的:采用来曲唑联合高脂乳剂建立的多囊卵巢综合征伴胰岛素抵抗（PCOS-IR）的模型大鼠为研究对象,观察桂枝茯苓丸对模型大鼠血清性激素水平和卵巢形态学及胰岛素抵抗以及卵巢颗粒细胞中PI3k/AKT/mTOR信号通路的蛋白表达变化,探索桂枝茯苓丸调控PCOS-IR大鼠排卵障碍的作用机制,从而为此方改善PCOS排卵障碍提供一定的科学依据。研究方法:6周龄Sprague-Dawley雌性健康大鼠72只,体重150±10g,所有大鼠适应性喂养4d,随机分为6组,每组12只。正常对照组:按10ml/kg每日给予生理盐水灌胃,连续30天;模型组每日灌胃高脂乳剂和来曲唑(1mg×kg-1·d)羧甲基纤维素钠（CMC-Na）溶液,连续30天;桂枝茯苓丸低剂量组给予相当于生药剂量0.31(g×kg-1·d)、桂枝茯苓丸中剂量组给予相当于生药0.62(g×kg-1·d)、桂枝茯苓丸高剂量组给予相当于生药1.24(g×kg-1·d)的桂枝茯苓丸混悬液(采用生理盐水配置,予每只大鼠10ml×kg-1·d)灌胃;二甲双胍组按照270mg×kg-1·d进行灌胃。采用H＆E染色法观察卵巢形态学变化;运用酶联免疫吸附试验检测大鼠血黄体生成素（LH）、血卵泡刺激素（FSH）、血睾酮（T）、血雌二醇（E2）水平以及空腹胰岛素（FINS）的含量;采用蛋白质印迹法检测实验大鼠卵巢中颗粒细胞的p-PI3k、p-AKT、p-mTOR蛋白表达水平。研究结果:（1）大鼠PCOS-IR模型的判定模型组大鼠与正常对照组大鼠相比较其动情周期基本紊乱;模型组大鼠比正常对照组大鼠的体重增长明显,差异具有统计学意义（P＜0.05）;与正常对照组相比,模型组大鼠卵巢组织H＆E染色,可见囊状卵泡和闭锁卵泡的数目增多;模型组大鼠空腹胰岛素水平较正常对照组上升,空腹血糖水平提高,胰岛素抵抗指数增长,判定成功建立PCOS-IR大鼠模型。（2）桂枝茯苓丸对大鼠血清T、E2、FSH、LH水平的作用与模型组相比,桂枝茯苓丸中药组及二甲双胍组大鼠血清中E2、FSH含量升高,LH、T水平降低,LH/FSH比值下降,差异有统计学意义（P＜0.05）。（3）桂枝茯苓丸对大鼠血清FINS、FBG、HOMA-IR的作用与模型组相比,桂枝茯苓丸中药组和二甲双胍组大鼠血清中的FINS水平下降,空腹血糖的含量降低,胰岛素抵抗指数减少,差异有统计学意义（P＜0.05）。（4）桂枝茯苓丸对大鼠体重的影响与模型组相比,桂枝茯苓丸高、中、低剂量组及二甲双胍组大鼠的体重增长降低,差异有统计学意义（P＜0.05）。（5）桂枝茯苓丸对大鼠卵巢组织卵泡及黄体的影响与模型组相比,桂枝茯苓丸高、中剂量组大鼠卵巢中各级卵泡数量以及黄体数量增加,囊状扩张性卵泡和闭锁卵泡对比模型组数量有所减少,差异有统计学意义（P＜0.05）。（6）桂枝茯苓丸对大鼠卵巢颗粒细胞中p-PI3k、p-AKT、p-mTOR水平的影响与模型组相比,桂枝茯苓丸高、中剂量组及二甲双胍组大鼠卵巢颗粒细胞中p-PI3k、p-AKT、p-mTOR的表达上调,差异有统计学意义（P＜0.05）。研究结论:（1）来曲唑联合高脂乳剂可成功构建多囊卵巢综合征伴胰岛素抵抗（PCOS-IR）的大鼠模型。（2）PCOS-IR大鼠出现体重增加,卵巢各级卵泡以及黄体数量减少,囊状扩张性卵泡以及闭锁卵泡增加,其机制可能是PCOS-IR模型大鼠的胰岛素抵抗,降低了PI3k/AKT/mTOR信号通路的转导。（3）桂枝茯苓丸可降低大鼠体重,增加大鼠卵巢的各级卵泡以及黄体数量,减少囊状扩张性卵泡和闭锁卵泡,降低雄激素水平、LH/FSH比值,可能是通过提高PCOS-IR大鼠胰岛素的敏感性,改善PCOS-IR模型大鼠的胰岛素抵抗情况,进一步激活PI3K/Akt/mTOR信号通路,改善PCOS排卵障碍的情况。
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