丁酸钠对结肠癌细胞的抑制及iNOS表达的影响

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目的:众多研究证明丁酸钠在体外对多种肿瘤细胞有抑制作用。HT—29细胞是一种研究常用的中分化大肠腺癌细胞株。本研究观察丁酸钠对大肠癌细胞株HT-29的生长增殖抑制情况,以及对诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)表达水平及其对一氧化氮(NO)分泌的影响,以探讨丁酸钠对结肠癌的作用机制。 方法:HT-29细胞株在含10%的小牛血清,100IU/ml青霉素,100μg/ml链霉素的RPMI1640培养基中,于37℃、5%CO2、饱和湿度条件下培养、增殖、传代、扩增以备用。采用1.0、2.0、5.0、10.0、20.0 mmol/L的丁酸钠对HT-29细胞进行干预,分别运用MTT法检测HT-29细胞株的增殖抑制情况,绘制丁酸钠对HT-29细胞的增殖抑制作用曲线,并计算其半数细胞抑制浓度(IC50值):免疫细胞化学(ICC)染色技术(SP法)对HT-29细胞胞浆内iNOS蛋白进行染色,图像分析系统检测iNOS表达水平的影响;Griess法检测HT-29细胞NO的分泌。 结果:对照组HT-29细胞生长抑制不明显,丁酸钠对HT-29细胞株增殖有抑制作用,此效应呈溶度、时间依赖性。在不同作用时间下,丁酸钠的IC50值不同(12小时为15.4 mmol/L,24小时为5.7 mmol/L,36小时为2.5 mmol/L,48小时为0.9 mmol/L)。丁酸钠也降低了HT-29细胞胞浆内iNOS的表达以及NO的分泌。此效应亦呈溶度、时间依赖性。 结论:丁酸钠能够抑制iNOS的表达水平,减少NO的分泌。这可能是它抑制大肠癌HT-29细胞增殖的作用机制之一。
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