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本文通过口服、注射及浸泡三种免疫途径研究了白斑综合征病毒(WSSV)重组疫苗对动物模型克氏原鳌虾(Procambarus clarkii)的免疫效果。采用原核(大肠杆菌BL21)与真核(毕赤酵母GS115)表达系统分别表达了WSSV的两个主要囊膜蛋白VP19和VP28,并以其作为重组疫苗研究抗WSSV效果。以病毒基因组为模板采用PCR技术扩增了WSSV的囊膜蛋白VP19和VP28的基因,测序后登录GenBank,接受号分别为DQ007314和DQ007315。采用BLAST分别分析其与GenBank已登录VP19和VP28基因的同源性,同源性分别达98%和100%。原核表达系统中的表达产物用SDS-PAGE及Western Immunoblotting进行检测,均出现了明显的特异性条带,大小分别为21 kDa(VP19)和28 kDa(VP28),与预测一致。VP19和VP28在真核表达系统中也成功获得表达,SDS-PAGE及Western Immunoblotting检测其大小分别为22 kDa(VP19)和35kDa(VP28)。分别纯化VP19和VP28的原核及真核表达产物,并将其作为重组疫苗进行免疫效果的研究。采用三种免疫途径:1)纯化的蛋白与颗粒料混合均匀后,作为口服疫苗免疫鳌虾25天;2)用330mM NaCl将纯化的蛋白溶解后,进行皮下注射连续免疫;3)用330mM NaCl将纯化的蛋白溶解后,进行浸泡连续免疫。经口攻毒25天后,统计其死亡率。研究发现:1)通过注射途径免疫的鳌虾相对存活率(RPS)最高,其次为口服和浸泡途径;2)VP28单独免疫组及VP19和VP28联合免疫组的RPS与VP19单独免疫组及对照组相比差异显著(>60%);3)真核表达系统所获的重组疫苗与原核表达产物相比,经免疫后RPS差异显著(>60%)。通过以上研究表达明,经免疫的方法预防与控制鳌虾WSSV病毒病是可行的。今后还需深入研究病毒与宿主的相互作用机理以进一步形成规范的免疫程序,以及选择更合适的表达系统来表达重组疫苗。