桃磷脂酶D家族基因鉴定及其在桃果实采后低温适应性中的作用分析

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桃属于冷敏感性水果,低温贮运过程中易发生冷害。磷脂酶D参与植物响应低温适应性的过程,但具体调控果实采后低温适应性的确切分子机理目前还不十分清楚。本论文在鉴定桃磷脂酶D家族基因的基础上,以久保水蜜桃(Prunus persica, cv. OKuBa)为研究对象,对桃果实在低温贮藏期间的冷害发生指标进行了分析,研究了桃果实发生冷害的规律,并结合热处理、正丁醇、水杨酸及1-甲基环丙烯处理,展开了对磷脂酶D响应桃果实采后低温适应性的作用研究。主要结果如下:(1)采用生物信息学手段,从已完成测序的桃基因组数据库中,鉴定出11条磷脂酶D基因,并将其分为、β、、、ζ和φ六类,其中磷脂酶D有3条,磷脂酶Dβ有2条,磷脂酶D有2条,磷脂酶D有1条,磷脂酶Dζ有2条,磷脂酶Dφ有1条;并对该基因家族进行了染色体定位、基因结构、功能结构域、系统进化等方面的生物信息学分析。(2)对热处理、正丁醇、水杨酸及1-甲基环丙烯处理的水蜜桃果实的冷害指标进行分析,结果说明,不同处理组的褐变指数、腐烂指数、相对电导率和丙二醛含量均呈上升趋势,但均低于对照组的各项指标,说明1-甲基环丙烯、水杨酸、正丁醇及热处理不同程度地抑制了冷害的发生,其中,1-甲基环丙烯的抑制效果最好,热处理的抑制效果最差,水杨酸和正丁醇的抑制效果相当。(3)采用荧光定量PCR技术研究了11条PpPLD mRNA的相对表达量。结果表明,在贮藏前期,对照组PpPLD mRNA的相对表达量不同程度地上升;水杨酸和正丁醇处理组相对表达量不同程度地下降;1-甲基环丙烯抑制了PpPLDɑ1、PpPLDɑ2、PpPLD、PpPLDβ2和PpPLDζ1mRNA的相对表达量,促使PpPLDɑ3、PpPLDβ1、PpPLD1、PpPLD2、PpPLDζ2和PpPLDφ mRNA的相对表达量上升;热处理使PpPLD1、PpPLD3、PpPLDβ1、PpPLDβ2、PpPLD1和PpPLDφ mRNA的相对表达量激增,而抑制了PpPLDɑ2、PpPLD2和PpPLDζ1mRNA的相对表达量。在贮藏后期,PpPLD1、PpPLD3、PpPLDβ2、PpPLD1、PpPLD2和PpPLDφmRNA的相对表达量呈现回升趋势,这可能与细胞膜的降解有关。
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