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研究背景:抑郁症(depression)是一种普遍多发的精神类疾病,在整个人群中具有极高的患病率和复发率,更为严重的会导致自残和自杀,造成了沉重的医疗负担。抑郁症的发生是由多种因素造成的,包括基因和环境复杂的相互作用,其中应激性生活事件被公认为是抑郁症发病的重要因素之一。下丘脑-垂体-肾上腺(hypothalamic-pituitary-adrenocortical,HPA)轴是机体主要的应激轴,在抑郁症的发病机制研究中普遍发现它的功能存在异常。而下丘脑作为神经系统和内分泌系统的调节枢纽,是HPA轴调控的核心脑区,对身体的应激反应发挥着至关重要的作用,在目前的抑郁症研究中,下丘脑结构及功能的变化鲜有报道。目的:运用蛋白组学方法分析CUMS抑郁模型小鼠下丘脑差异蛋白的表达谱及其相关通路,试图阐释这部分差异蛋白改变的病理生理机制及其功能,最后揭示下丘脑结构功能改变与蛋白表达谱改变的关系,探讨抑郁症疾病状态下可能的分子机制,为抑郁症的诊断和治疗提供新的理论依据。方法:我们随机地把正常的C57BL/6J雄性小鼠分为抑郁模型组和正常对照组,每组各15只。待抑郁模型组小鼠进行28天的慢性温和性刺激后,对两个组的小鼠进行糖水偏好,旷野实验和强迫游泳实验等行为学评价。然后,随机选取每组9只小鼠下丘脑进行双向凝胶电泳分离,挖取差异蛋白点用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALD-TOF/TOF)进行蛋白鉴定,对差异表达蛋白进行生物信息学分析。另外每组选取6只小鼠,在下丘脑中对差异蛋白进行Western blot方法验证。结果:1、抑郁模型组小鼠体重、糖水偏好、旷野实验和强迫游泳等行为学均较正常组小鼠有统计学差异,说明抑郁模型小鼠构建成功。2、对双向电泳图像分析发现模型小鼠下丘脑蛋白表达谱中在1.5倍以上差异的表达蛋白点有41个(P<0.05),通过MALD-TOF/TOF差异蛋白鉴定,最终鉴定出37个蛋白质其中13个蛋白表达上调,24个蛋白表达下调。3、对差异蛋白进行GO和KEGG Pathway分析,结果显示这些差异蛋白主要集中在线粒体上,与糖代谢、氨基酸代谢和谷氨酸能神经突触相关。4、通过对谷氨酸去除途径的节点蛋白WB验证,结果显示抑郁组胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和谷氨酰胺合成酶(GS)表达较正常组明显减少(P<0.05),与双向电泳结果一致。结论:CUMS模型小鼠下丘脑差异蛋白组学结果提示谷氨酸去除通路障碍、谷氨酸能神经突触功能异常和能量代谢紊乱可能在抑郁症发病时发挥了重要作用。