漆斑菌对葡萄黑痘病等病害的生物防治研究

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葡萄在世界水果中占有重要位置,目前生产上的主要栽培葡萄品种为欧亚种(Vitis vinifera L.),欧亚种葡萄品质优良,但易感多种真菌病害。葡萄黑痘病是影响葡萄产量与品质的主要病害之一,目前主要以化学防治为主,但化学防治增加生产成本,农药高残留造成环境污染,并且还会带来食品安全的潜在问题,反复使用会增强病原菌的抗药性。因此,亟待开发一种绿色、安全、无污染的生物防治方法来有效防控葡萄黑痘病。本研究聚焦葡萄黑痘病防治的产业问题,选用三种漆斑菌(Myrothecium spp.)探讨其对葡萄黑痘病的防治效果,主要结果如下:1、三种漆斑菌对葡萄黑痘病菌有显著抑制作用,抑制效果由强到弱依次为:M.verrucaria、M.roridum、M.cinctum。对峙实验结果表明M.verrucaria对黑痘菌落抑制率为54.7%,M.roridum抑制率为31.8%,M.cinctum抑制率为28.3%;漆斑菌浸提液对菌丝抑制实验发现以M.verrucaria最为显著,5%浓度下可完全抑制黑痘菌丝生长,M.roridum浸提液在10%浓度下可完全抑制黑痘菌丝生长,M.cinctum浸提液在15%浓度下能完全抑制菌丝生长;孢子萌发试验表明M.verrucaria浸提液在5%浓度下分生孢子萌发率为5%,而对照萌发率为75%。2、三种漆斑菌浸提液对葡萄黑痘病有显著的生物防治效果。在欧洲葡萄‘无核白’叶片表面采用两种浸提液接种方式,即在接种黑痘病孢子悬浮液之前、之后分别接种漆斑菌浸提液,发现三种漆斑菌浸提液均能有效抑制黑痘病菌的菌丝生长,减少病斑面积,减轻发病程度。三种漆斑菌浸提液处理葡萄叶片后的病情指数、孢子萌发率和黑痘菌生物量显著低于对照。防治效果由强到弱依次为:M.verrucaria、M.roridum和M.cinctum。通过比较不同处理间的防治效果发现接种前喷施漆斑菌浸提液比接种后喷施的防治效果好。3、疣孢漆斑菌(M.verrucaria)对葡萄灰霉病也有显著的防治效果,而对霜霉病和炭疽菌的抑制效果不明显。利用感病欧洲葡萄‘无核白’和‘红地球’的叶片和果实进行生防试验,结果表明M.verrucaria浸提液处理叶片后,病情指数、孢子萌发率和灰霉菌生物量均显著低于对照;处理果实后有效减少灰霉病的发病程度,灰霉菌生物量显著低于对照;先接种M.verrucaria浸提液后接种灰霉菌的防治效果较好。M.verrucaria浸提液对葡萄霜霉病的防治效果与对照无显著差异,20%浓度下仍不能完全抑制葡萄炭疽菌的生长,说明葡萄霜霉菌和炭疽菌对M.verrucaria的敏感性较差。4、疣孢漆斑菌的主要抑菌物质为疣孢菌素A。通过对疣孢漆斑菌发酵液提取浓缩、分离纯化及抑菌物质筛选,最终得到抑菌效果较好的G1和H1组分;进一步通过高效液相色谱、核磁质谱等技术对化合物进行结构鉴定,根据核磁共振~1H和13C NMR数据显示该抑菌物质为疣孢菌素A(Verrucarin A)。
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