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目的:老年肾虚耳聋是老龄化社会的常见病、多发病,属于生理性老化的过程。祖国医学在长期的耳聋诊治中已摸索和积累了丰富的经验,耳聋左慈丸是治疗老年肾虚耳聋的经典方剂,应用于临床已数十载,疗效显著,但其作用机制甚不完善。本实验成功复制老年肾虚耳聋小鼠模型,旨在研究耳聋左慈丸治疗老年肾虚耳聋的作用机制是否是通过调节耳蜗中的AQP4表达而发挥治疗作用。材料与方法:12月龄清洁级昆明小鼠66只按随机数字表法随机抽取50只(造模之前剔除听力异常的小鼠)根据文献记载的造模方法:氢化可的松腹腔注射后经ABR听力测试成功制备老年肾虚耳聋模型小鼠32只。按随机数字表法将肾虚耳聋小鼠分为模型组16只,中药组16只。将剩余16只小鼠为正常对照组。采用ABR听力测试检测三组老年小鼠的听力情况,耳蜗铺片技术观察三组小鼠耳蜗毛细胞与支持细胞的排列与分布。免疫组化技术和Western-blot技术检测三组小鼠耳蜗中AQP4蛋白表达量的变化。结果:1.老年肾虚耳聋小鼠一般状态的变化正常对照组小鼠活泼好动,毛发光泽,饮食水自如,体重逐渐增加,大小便均正常。模型组小鼠出现明显食量和体重下降,体毛枯槁欠光泽,活动减少蜷缩聚集,小便量多,大便稀软。中药组小鼠出现食量增大,体重逐渐增加,毛发逐渐光泽,活动增加,二便正常。2.老年小鼠ABR听力检测与正常对照组比较,模型组小鼠听力丧失,听力阈值升高明显。正常对照组与模型组的差异具有统计学意义(P<0.05)。中药组老年小鼠听力尚正常,与模型组比较具有显著差异,其差异具有统计学意义(P<0.05)。3.小鼠耳蜗铺片技术与正常对照组比较,模型组耳蜗毛细胞与支持细胞排列混乱,大片缺损,正常对照组与模型组比较具有显著的差异,其差异具有统计学意义(P<0.05);中药组耳蜗毛细胞和支持细胞排列较整齐,边界尚清楚。与模型组比较具有显著差异,其差异具有统计学意义(P<0.05)。4.免疫组化方法检测耳蜗组织AQP4蛋白表达:与正常对照组比较模型组耳蜗组织AQP4蛋白表达量下调,其差异具有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较中药组耳蜗组织AQP4蛋白表达量上调,其差异具有统计学意义(P<0.05)。5.Western-blot方法检测耳蜗组织AQP4蛋白表达:与正常对照组比较模型组具有显著的差异表现为耳蜗组织AQP4表达下调,其差异具有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较中药组具有显著的差异表现为AQP4表达上调,其差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:1.老年小鼠出现体毛枯槁无光泽或稀疏脱落;四肢无力,活动少;听力减退(至少一耳ABR阈值≥15db)为肾虚耳聋模型制备成功。证明老年肾虚耳聋模型制备成功。2.老年肾虚耳聋小鼠耳蜗铺片显示模型组耳蜗毛细胞与支持细胞缺失或脱如,排列散乱。证明老年肾虚耳聋小鼠耳蜗形态学具有显著变化。3.耳聋左慈丸对老年肾虚耳聋确实有显著的治疗效果,其治疗作用可能通过上调耳蜗组织AQP4蛋白表达量实现的。