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目的癫痫（epilepsy,EP）是一种常见的中枢神经系统疾病,它是一种以长期性的产生癫痫发作的倾向为特征的慢性脑部疾病。在我国,癫痫的整体患病率在7‰,其中大多数在儿童时期起病,癫痫的发生对患儿的生活质量和学习活动产生了巨大的影响,也对其家庭和社会造成了严重的负担。作为一种多病因疾病,遗传因素、脑部创伤、肿瘤生长、感染、畸形、免疫等均可引起癫痫。尽管病因有很大的变异性,但线粒体功能障碍及动力学改变越来越受到国内外学者的关注,成为癫痫研究的新热点。癫痫发作时,细胞受刺激后可产生大量的氧自由基,引起氧化应激损伤和神经元凋亡,影响线粒体功能。另一方面,线粒体不断的进行分裂和融合,在高度动态中得以维持细胞的正常功能状态。其中抑制动力相关蛋白（dynamin-related protein 1,Drp1）和Fis1调节线粒体分裂,在线粒体依赖的凋亡途径中起到关键性的作用,而线粒体分裂蛋白抑制剂（mitochondrial division inhibitor,Mdivi-1）通过抑制Drp1的作用,来影响线粒体的分裂。目前国内外关于线粒体动力学在癫痫发作中对神经细胞损伤的作用及其机制的相关研究报道尚不多见。线粒体分裂对癫痫神经细胞的影响是否存在年龄依赖性?Mdivi-1是否能够改善癫痫发作后的神经细胞损伤?且保护作用的机制仍未完全阐明。因此,本实验通过建立戊四氮（pentylenetetrazole,PTZ）慢性点燃癫痫幼年大鼠模型,观察使用干预剂Mdivi-1后对癫痫幼年大鼠行为学的影响,并检测各组海马组织Drp1、半胱天冬酶3（Caspase-3）基因及蛋白的表达情况,从而探讨Mdivi-1对戊四氮致痫幼年大鼠海马神经元损伤中的保护作用。方法选择90只清洁级Wistar雄性大鼠,年龄3-4周,体重50-70克,随机分为3组:A组（空白对照组,n=30）、B组（癫痫组,n=30）、C组（干预组,n=30）。B、C组每日定时腹腔注射PTZ,按40 mg/kg计量,A组每日在同一时间给予与PTZ等量的生理盐水,先后于14天内慢性点燃癫痫模型。造模成功后,C组注射PTZ前30min给予腹腔注射Mdivi-1（1.2 mg/kg）;A组及B组在相同时间给予腹腔注射与干预剂相等量的生理盐水。每次注射完毕后,观察幼年大鼠行为2小时,并记录其行为学表现。干预完成后分别于3h、24h、72h取材,使用戊巴比妥腹腔注射麻醉,断头后手术分离出双侧海马组织。采用Western blot法检测Drp1和Caspase-3蛋白表达水平,RT-PCR法检测Drp1和Caspase-3基因水平表达,以及各组幼年大鼠海马组织的免疫组化情况。结果1、行为学观察:空白对照组幼年大鼠在注射生理盐水后无癫痫发作,活动未受影响,B、C组幼年大鼠在连续注射PTZ后逐渐出现Ⅱ-Ⅴ级的惊厥发作,随着建模时间的延长,发作时间及发作频率逐渐增加,最终达到慢性点燃标准。给予Mdivi-1干预后,B组与C组幼年大鼠对比行为学表现,未见明显差异。2、RT-PCR结果:与A对照组相比,B组及C组给予PTZ点燃癫痫模型后,细胞中Drp1和Caspase-3的m RNA表达均有明显增高（P<0.05）,且经Mdivi-1干预处理,C组各时段Drp1和Caspase-3 m RNA表达较B组减少（P<0.05）,与A组相比无明显差异（P>0.05）。A组组内3h、24h、72h各时段之间Drp1和Caspase-3 m RNA表达均无统计学意义（P>0.05）,B组24h Drp1及Caspase-3m RNA表达明显高于3h、72h时（P<0.05）,C组Drp1 m RNA表达在24h时存在高峰,但其Caspase-3 m RNA在各时间段的表达未见明显差异（P>0.05）。3、Western-blot结果:结果显示,B组各时段Drp1蛋白在海马中的表达水平较A组均明显升高,差异具有统计学意义（P<0.05）;A组各时段间蛋白表达水平无明显改变（P>0.05）;C组各时段蛋白表达水平均明显低于B组（P<0.01）,与A组间之间无明显统计学差异（P>0.05）。各组间Caspase-3蛋白表达量结果于此相似。4、免疫组化结果:与空白对照组相比,各时间段B组脑组织海马区Drp1阳性表达均上调（P<0.01）,而C组阳性细胞数下降（P<0.05）。各时间段B组大鼠脑组织海马区Caspase-3阳性表达较A组均上调,差异具有统计学意义（P<0.05）,而C组阳性细胞数均较B组下降（P<0.05）。结论1.幼年大鼠癫痫发作后,海马组织神经元内Drp1蛋白及Drp1 m RNA表达明显增加,证明了慢性癫痫病理损伤过程中有线粒体分裂的参与,故线粒体动力学改可能与儿童癫痫发生有关;2.Mdivi-1可能是通过影响Cytochrome C信号转导途径及Caspase-3激活通路,对癫痫幼年大鼠海马神经元起到保护作用;3.抑制线粒体分裂可为儿童慢性难治性癫痫的治疗提供新思路和新方向。