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流式细胞术(flow cytometry,FCM)是一项新型的,发展迅速的生物医学分析技术。近年来将流式细胞术和荧光微球结合起来,一种新兴的流式荧光微球技术应运而生。这种分析技术可结合多种免疫分析方法,实现同时对多种抗原或者病毒进行检测和筛选,极大的提高了分析效率。流式荧光微球分析方法的核心技术是荧光编码微球的制备。要求标记微球的荧光染料具有较大的斯托克斯位移。本组早期的研究工作发现,中位氮取代七甲川菁染料有大斯托克斯位移现象。本论文工作在此基础上合成出了2,3,3-三甲基-3H-吲哚的两端N原子上引入苄基以提高光稳定性的七甲川菁染料母体,将母体染料的中位氯原子用胺基试剂亲核取代,得到了五个非水溶性的中位氮取代七甲川菁染料。其中四个脂肪族氨基取代染料的斯托克斯位移均大于100nm,荧光量子产率在0.1左右；一个芳香族氨基取代染料的荧光量子产率较低,但光稳定性好于脂肪族氨基取代染料。本论文考虑到七甲川菁染料光稳定性比较差,合成了两个用于乳液聚合法制备荧光微球的、稳定性更好的荧光染料。其中用于包覆法的荧光单体制备方法简单,荧光量子产率可达到0.6左右；用于共聚法的荧光单体由于存在分子内的光致电子转移(photoinduced electron transfer, PET)现象,荧光量子产率仅为0.1左右,pH滴定显示随着酸性的增加,荧光显著增强,且染料斯托克斯位移可达到100 nm左右。透射电子显微镜(transmission electron microscope, TEM)显示上述两种方法制得的微球粒径分布较均匀,直径为150 nm左右；用包覆法制备出的微球为核／壳型结构,用共聚法制备出的微球为实心结构。此外,本论文还采用聚丙烯酰胺凝胶电泳前染色方法,考察了多种类型活性染料与牛血清白蛋白共价染色的条件。发现活性蓝KN-R型标记效果最佳,其优化标记条件为：pH 10.0,60℃,50 min,蛋白检测限达200 ng,重复性和测试范围内的定量性较好,可在电泳时直接实时观测,作为蛋白标示剂有一定的应用前景。