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目的:通过体外培养的星形胶质细胞(astrocyte, Ast)划伤模型,观察反义波形蛋白(vimentin, Vim)cDNA逆转录病毒对培养损伤的Ast细胞细胞形态、生长曲线的作用,及其对中间丝Vim和胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein, GFAP)表达的影响;建立大鼠脊髓半横断损伤模型,观察大鼠脊髓损伤(spinal cord injury, SCI)后运动功能及中间丝蛋白表达的变化,并初步探讨反义Vim cDNA逆转录病毒、硫酸软骨素酶ABC及二者联合应用对大鼠SCI后中间丝蛋白表达变化的影响,为进一步深入研究反义Vim cDNA逆转录病毒、硫酸软骨素酶ABC及二者联合应用对大鼠SCI后胶质瘢痕形成的作用,探讨其对神经再生的影响提供初步的研究基础。方法:第一部分,利用大鼠乳鼠大脑皮层组织培养Ast细胞,建立体外培养Ast细胞划伤模型,通过形态学观察、细胞计数等研究反义Vim cDNA逆转录病毒对损伤的Ast细胞的影响,并通过细胞免疫荧光、RT-PCR、Western blot等方法研究Vim和GFAP表达的变化。第二部分,建立大鼠T10-T11脊髓半横断损伤模型,通过RT-PCR、Western blot等方法研究Vim和GFAP表达的变化,并通过反义Vim cDNA逆转录病毒及硫酸软骨素酶ABC局部作用于受损脊髓组织,研究其对Vim和GFAP表达变化的影响。结果:1.反义Vim cDNA逆转录病毒转染损伤的Ast细胞后,细胞突起回缩,细胞生长曲线减缓,RT-PCR示Vim mRNA表达减低,细胞免疫荧光及Western blot结果提示Vim和GFAP蛋白水平表达下调。2.大鼠脊髓半横断后,损伤侧后肢完全瘫痪,损伤对侧不完全瘫痪,2 w时损伤侧后肢无明显变化,损伤对侧运动功能明显恢复;免疫组织化学染色提示损伤部位胶质瘢痕形成,GFAP及Vim表达增加;RT-PCR示Vim基因表达明显上调,Western blot示GFAP和Vim均明显表达。