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本研究建立了克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、利托君、特布他林、班布特罗、异舒普林7种β-兴奋剂类药物在猪尿液及组织中的高效液相—电喷雾串联质谱多残留检测和确证方法。
猪尿样品和可食用组织样品先经过β-葡萄糖苷酸酶酶解,组织样品再由高氯酸酸解,然后提取上清水相调节其pH值9.6左右,通过乙酸乙酯-异丙醇(6/4,V/V)和叔丁基甲醚液液萃取后,离心、提取有机相,吹干后过HLB柱净化,上机检测。
样品浓度范围在0.5~10.0μg/L(μg/kg)之间,7种药物的峰面积与样品的质量浓度呈现良好的线性,相关系数大于0.9900。7种β-兴奋剂类药物在尿液中的检测限(LOD)和定量限(LOQ)范围为:0.024~0.27、0.07~0.91μg/L;肌肉中LOD和LOQ范围为:0.036~0.12、0.16~0.54μg/kg;肝脏中LOD和LOQ范围为:0.033~0.20、0.10~0.63μg/kg;肺脏中LOD和LOQ范围为:0.050~0.30、0.16~0.92μg/kg;肾脏中LOD和LOQ范围为:0.030~0.19、0.11~0.62μg/kg。
尿液样品,添加0.5、1.0、5.0μg/L三个水平,按照上述方法处理,七种药物的回收率(%)、批内变异系数(%)、批间变异系数(%)分别为:克伦特罗69.5~84.9、2.9~7.7、4.3~8.3,沙丁胺醇58.4~82.4、3.1~12.5、8.2~13.9,莱克多巴胺68.8~82.7、2.6~9.4、5.3~6.7,利托君77.1~91.0、2.2~9.9、3.9~6.7,特布他林57.1~84.6、4.9~11.2、7.1~13.7,班布特罗79.6~92.6、2.7~6.0、4.7~5.3,异舒普林77.1~85.8、3.1~7.8、3.7~4.7。
肌肉样品,添加0.5、1.0、5.0μg/kg低、中、高三个水平,按照上述方法处理,七种药物的回收率(%)、批内变异系数(%)、批间变异系数(%)分别为:克伦特罗69.5~75.9、4.4~9.5、5.0~5.9,沙丁胺醇64.8~75.9、4.4~9.5、4.9~5.9,莱克多巴胺65.6~87.4、3.9~10.6、6.8~12.4,利托君75.5~95.0、2.5~11.4、3.6~9.5,特布他林61.6~78.0、3.4~10.3、6.7~11.3,班布特罗80.6~104.2、3.1~8.7、4.4~11.7,异舒普林73.9~87.0、2.1~9.6、2.4~8.1。
肝脏样品,添加0.5、1.0、5.0μg/kg三个水平,按照上述方法处理,七种药物的回收率(%)、批内变异系数(%)、批间变异系数(%)分别为:克伦特罗64.2~80.4、5.7~11.0、6.0~7.5,沙丁胺醇59.0~80.5、5.0~10.2、3.5~13.4,莱克多巴胺64.5~81.5、2.6~8.9、7.2~12.2,利托君80.8~92.6、2.8~8.7、2.7~4.0,特布他林57.5~76.1、4.7~8.2、4.3~10.6,班布特罗74.4~93.8、4.3~7.4、5.5~7.0,异舒普林71.7~87.5、3.3~6.6、4.0~7.1。
肺脏样品,添加0.5、1.0、5.0μg/kg三个水平,按照上述方法处理,七种药物的回收率(%)、批内变异系数(%)、批间变异系数(%)分别为:克伦特罗67.3~85.2、3.7~9.8、4.9~8.8,沙丁胺醇65.8~83.5、3.3~8.9、6.8~10.2,莱克多巴胺64.5~86.6、3.8~8.4、6.4~12.3,利托君74.8~90.9、3.7~7.7、5.6~8.7,特布他林58.4~88.8、2.6~12.6、7.4~14.7,班布特罗75.8~93.8、2.8~8.0、3.9~6.9,异舒普林71.1~86.5、3.5~9.2、3.8~7.9。
肾脏样品,添加0.5、1.0、5.0μg/kg三个水平,按照上述方法处理,七种药物的回收率(%)、批内变异系数(%)、批间变异系数(%)分别为:克伦特罗64.6~86.2、3.8~12.0、9.0~10.1,沙丁胺醇57.3~81.8、4.0~8.7、7.6~13.7,莱克多巴胺65.4~86.4、3.4~11.2、3.4~9.1,利托君73.6~85.3、2.7~8.1、3.4~7.3,特布他林62.3~90.2、3.9~8.9、10.9~15.3,班布特罗72.9~93.4、3.3~7.3、4.3~9.2,异舒普林76.1~86.0、2.6~6.3、2.7~5.2。
结果表明,本研究所建立的方法灵敏、准确、线性范围宽、易于操作,符合残留检测的要求,可以应用于生产过程监管和出口把关检测的高灵敏度确证分析方法。