手性SWCNTs的分离及其与胆酸类药物复合物对HePG2的毒性研究

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单壁碳纳米管(SWCNTs)因具备优异的性能而备受关注,在药物输送、分子探针和生物传感器等领域有着广泛的应用前景。SWCNTs可以作为药物的载体,将药物运输到生物体内,以提高药物的生物利用度。然而,由于SWCNTs间存在较大的范德华力,通常以管束形式存在,在水及有机溶剂中难以分散。同时,常规生长方法所得的样品为不同手性体的混合物,还含有无定形碳及金属催化剂颗粒杂质。如何将其分散并分离是实现其后续应用的关键。  本研究首先对超声分散条件进行了筛选,如超声时间和超声功率对于SWCNTs分散的影响,建立了SWCNTs的超声分散方法。在最佳超声条件:超声功率为225W,超声1h下,对所选的7种胆酸盐分散SWCNTs的能力进行了考察和分析。UV-Vis-NIR光谱测试结果表明,所选的7种胆酸盐均可作为分散剂实现SWCNTs的均匀分散。在同等低分散浓度下,胆酸钠的分散效果最佳,牛磺脱氧胆酸钠次之,脱氧胆酸钠最弱。建立了手性SWCNTs的双水相萃取分离方法。对9种水溶性聚合物所组成的双水相系统进行了筛选,确定了可以用于手性SWCNTs分离的双水相系统。其组成为聚乙二醇(15%,Mw=6k Da)/葡聚糖(15%,Mw=70k Da)。继而采用此系统,对脱氧胆酸钠和牛磺脱氧胆酸钠分散的碳纳米管分散液中手性SWCNTs(6,5)进行分离。UV-Vis-NIR光谱和荧光光谱测试结果均表明,通过双水相萃取获得了高纯度的(6,5)。此外,还考察了不同pH和不同价态盐溶液对手性SWCNTs分离的影响。发现随着体系pH的降低或同离子强度盐的价态升高,SWCNTs均有向双水相中上相迁移的趋势。当pH为3.40时,可以分离出纯度较高的(6,5)。对三种具有抗肿瘤活性的胆酸盐甘氨脱氧胆酸钠、鹅去氧胆酸钠和熊去氧胆酸钠,及其与SWCNTs的复合物对于人肝癌HepG2细胞的毒性作用进行了探索。结果表明,在同等药物浓度下,三种复合物的细胞毒性远高于纯药物的细胞毒性作用,且被手性SWCNTs(6,5)负载的甘氨脱氧胆酸钠(Sodium glycodeoxycholate,SGD)比同等浓度下的纯药物及药物与碳管复合物的细胞活性抑制作用更强,其半抑制浓度48.37μg/mL,约为纯SGD半抑制浓度的0.6倍,SGD-SWCNTs半抑制浓度的0.8倍。
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