益气活血方对动脉粥样硬化家兔血液流变学和动脉平滑肌细胞增殖的影响

来源 :河北医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liang672369282
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本研究应用高脂饲料喂养建立动脉粥样硬化家兔模型,以硝苯地平为对照,通过检测家兔血液流变学主要指标、腹主动脉血小板源生长因子B链和平滑肌α-肌动蛋白的表达,旨在探讨益气活血方芪丹煎防治动脉粥样硬化的机制,为进一步扩大益气活血方芪丹煎的临床应用提供理论依据。 研究方法: 1.动物分组及处理:将24只4月龄健康雄性新西兰白兔,(体重2.4~2.9kg),随机均分为四组,即正常对照组、模型组、芪丹煎实验组和硝苯地平对照组。模型组每天喂饲高脂颗粒饲料;芪丹煎实验组每兔每天喂饲按100g饲料含生药60g的量制成的高脂颗粒饲料;硝苯地平对照组每天喂饲按每兔每日40mg硝苯地平的量制成的高脂颗粒饲料;正常对照组每天喂饲普通颗粒饲料。每组每天进食总量相等,限制为100g,动物分笼饲养,自由饮水,实验全程12周。12周后,各组家兔耳缘静脉采血,用于检测血小板粘附性和聚集性、血液流变学主要指标;麻醉后开胸取活体胸主动脉组织(大小约1×1×0.5mm),于4%戊二醛固定,用于透射电镜检查超微结构的变化;放血处死家兔,取腹主动脉置于10%中性甲醛固定液,用于HE染色和血小板源生长因子B链、平滑肌α-肌动蛋白的免疫组化检测。 2.观察指标:(1)血小板粘附性和聚集性的测定;(2)血液流变学主要指标的测定;(3)HE染色病理观察;(4)透射电镜主动脉观察;(5)血小板源生长因子B链和平滑肌α-肌动蛋白免疫组化图象分析。 研究结果: 1.成功建立动脉粥样硬化模型。 2.HE染色病理观察:正常对照组可见主动脉内膜表面光滑,中层平滑肌细胞数量不多。模型组可见主动脉内膜明显增厚,管腔内有动脉粥样斑块形成,中层平滑肌细胞数量明显增多。芪丹煎实验组内膜增厚不明显,管腔内有少量动脉粥样斑块形成,中层平滑肌细胞数量无明显增多。硝苯地平对照组可见内膜增厚不明显,管腔内有动脉粥样斑块形成,中层平滑肌细胞数量增多。 3.透射电镜主动脉观察:正常对照组家兔主动脉超微结构正常。模型组家兔主动脉内膜破坏,结构紊乱,内膜和中膜之间有大量泡沫细胞,中膜结缔组织大量增生,平滑肌细胞增生且穿过内膜组织向管腔内生长。芪丹煎实验组主动脉超微结构的病理变化明显减轻,内膜基本平整,内膜和中膜之间有结缔组织增生,未见泡沫细胞,中膜结缔组织增生不显著。硝苯地平对照组主动脉超微结构有轻度异常。 4.血小板粘附性和聚集性的变化:与正常对照组比较,模型组、芪丹煎实验组、硝苯地平对照组血小板粘附率和聚集率均明显升高(P<0.01)。与模型组比较,芪丹煎实验组、硝苯地平对照组血小板粘附率和聚集率明显减少(P<0.01)。与硝苯地平对照组比较,芪丹煎实验组血小板聚集率明显降低(P<0.05),血小板粘附率有降低趋势,但无统计学意义。 5.血液流变学主要指标的变化:与正常对照组比较,模型组全血黏度(包括低切、高切)、血浆黏度及红细胞压积均明显升高(P<0.01,P<0.05)。与模型组比较,芪丹煎实验组、硝苯地平对照组全血黏度(包括低切、高切)、血浆黏度及红细胞压积均明显降低(P<0.01,P<0.05)。 6.各组家兔腹主动脉血小板源生长因子B链表达的变化:与正常对照组比较,模型组、芪丹煎实验组、硝苯地平对照组腹主动脉的血小板源生长因子B链表达量明显升高(P<0.01)。与模型组比较,芪丹煎实验组、硝苯地平对照组的血小板源生长因子B链表达量明显降低(P<0.01)。与硝苯地平对照组比较,芪丹煎实验组的血小板源生长因子B链表达量明显降低(P<0.01)。 7.各组家兔腹主动脉平滑肌α-肌动蛋白表达的变化:与正常对照组比较,模型组、芪丹煎实验组、硝苯地平对照组α-肌动蛋白的表达量明显降低(P<0.01)。与模型组比较,芪丹煎实验组、硝苯地平对照组α-肌动蛋白的表达显著增强(P<0.01)。与硝苯地平对照组比较,芪丹煎实验组的α-肌动蛋白表达量明显增强(P<0.01)。 研究结论:本研究结果显示,益气活血方芪丹煎对动脉粥样硬化有良好的防治作用,推测其作用机制包括以下几个方面:(1)抑制血小板粘附聚集,降低血液粘稠度,改善血液流变性;(2)抑制主动脉血小板源性生长因子B链的表达,上调主动脉平滑肌α-肌动蛋白的表达,抑制血管平滑肌细胞表型转化及增殖。
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