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显色反应是一种灵敏的颜色变化的反应,被广泛应用于体系中离子,蛋白质,DNA等物质的比色检测,操作简单,无需使用复杂仪器,检测结果可视化。本论文基于纳米金生长引起溶液颜色改变的原理,构建了一种新的酶联免疫法(ELISA);找到并研究一种新的纳米金显色反应;基于该纳米金显色反应的氧化还原调控性质,进行酶和疾病标记物的检测。具体内容如下: (1)纳米金生长的显色反应用于疾病标记物的可视化检测 基于乙醇脱氢酶催化调控纳米金种子生长,溶液颜色从黄色转变成紫色。由此构建新的ELISA体系,实现对疾病标记物乙肝表面抗原(HBsAg)和甲胎蛋白(AFP)的检测,裸眼检测的最低浓度为1.0×10-12gmL-1,并进一步检测人体血清中存在的HBsAg,为ELISA检测提供一种新的思路。 (2)利用ABTS的新型显色反应的发现及其性质研究 发现一种基于HAuCl4和ABTS的新显色反应。随着加入的HAuCl4浓度依次降低,溶液颜色响应呈现从红色到绿色的变化过程。考察不同浓度ABTS以及溶液pH对颜色变化造成的影响。 (3)基于H2O2/NADH氧化还原调控的显色反应及其应用 在HAuCl4和ABTS的新显色反应中引入H2O2或者NADH,溶液颜色发生改变,表明是一种可氧化还原调控的显色反应。利用H2O2对此显色反应的调控作用,实现对过氧化氢酶浓度的裸眼检测。设计了一种基于过氧化氢酶分解H2O2的ELISA体系,用于检测HBsAg浓度,裸眼检测的最低浓度为10-12gmL-1。