蚂蚁化学成分与抗炎活性研究

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在我国古代起就有以蚁类治疗疾病的先例。中国药典中记载蚂蚁归肝肾,补肾益精,主治头昏肾虚耳鸣,遗精阳痿,风湿,偏瘫中风等疾病。针对蚂蚁的药用研究,我国学者大多是遵循中医药学的研究特点,即按照经验医学,先临床后基础实验。其中最著名的是当代蚂蚁疗法的开拓人吴志成教授,他结合中医疗法和临床及学术思想提出以蚂蚁为君药,治疗类风湿、强直性脊柱炎、乙肝和病毒型乙肝。中药发挥药效是其化学成分相互的协同作用,两者之间有着密切地关联。目前关于蚂蚁化学成分与药效活性的研究很少,导致蚂蚁在治疗疾病方面的应用受到限制。为了系统而深入地研究中药蚂蚁药效活性基础,本实验从主治急慢性肝炎的复方肝络欣的君药红蚂蚁(Tetramorium.sp)为出发点,首先采用硅胶、Sephadex LH-20、 ODS等柱层析分离技术,针对红蚂蚁90%醇提水沉物的氯仿层和正丁醇层进行分离纯化,得到9个单体化合物。采用核磁(NMR)和质谱(MS)等波谱技术,确定了8个化合物的结构,其中化合物3、6以及7为首次从该种蚂蚁中分离得到。其次围绕12种不同产地的蚂蚁,水蒸气蒸馏提取其挥发油,GC-MS分析其成分差异,结合后面的巨噬细胞抗炎因子实验,探讨蚂蚁挥发油化学成分与其抗炎活性之间的关系。另外针对红蚂蚁中的三萜类物质进行了初步探究,通过化学、物理手段证实其存在,并对其进行定量,确定该蚂蚁中的三萜类物质含量在2-3%左右。脂多糖(Lipopolysaccharides.LPS)能诱导小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7发生炎症反应,释放炎症因子,如肿瘤坏死因子和白细胞介素等。本课题以酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay.ELISA)来测定炎症因子的含量,初步探究了红蚂蚁的甲醇/丙酮粗提物、挥发油、四种分离的单体化合物对这两种炎症因子产生水平的抑制作用。结果证实甲醇/丙酮粗提物、挥发油、单体化合物均具有一定程度的抗炎活性。结合10个批次粗提物的LC-MS谱图以及挥发油GC-MS数据,以偏最小二乘回归分析(partial least squares regression. PLSR)探究了谱图中与抗炎活性相关的峰,以及其对抗炎活性的贡献大小。
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