盆栽小菊高频再生体系建立与试管开花研究

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本试验利用盆栽小菊花瓣作为外植体,建立以花瓣为外植体的高频快繁再生系统。试验以MS作为基本培养基,添加生长素与细胞分裂素,通过正交试验方法筛选出愈伤组织诱导、不定芽分化以及继代增殖中最优激素配方。针对不定芽玻璃化现象采用提高渗透压、减少细胞分裂素浓度、降低培养瓶内空气湿度进行调控。通过离体培养盆栽小菊花芽进行试管开花诱导,通过单因子筛选影响因素,研究不同植物生长激素在植株试管开花中的作用。研究结果表明:(1)盆栽小菊 ’ Chrystal Pink’品种愈伤分化的最适培养基配方为MS+NAA1.2mg/L+6-BA1.0mg/L+TDZ 0.4mg/L,诱导率为 74.56%。’Rainbow Worth’ 品种为MS+NAA1.2mg/L+6-BA1.5mg/L+TDZ0.2mg/L,诱导率为 77.21%。’Chrystal Bronze’ 品种为MS+NAA0.3mg/L+6-BA1.0mg/L+TDZ0.4mg/L,诱导率为 62.23%。’ Little Rock ’ 为MS+NAA1.2mg/L+6-BA1.0mg/L+TDZ0.4mg/L,诱导率为 28.87%。(2)盆栽小菊品种 ’Chrystal Pink’、’Rainbow Worth’、’Chrystal Bronze’ 最佳不定芽诱导培养基为 MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L,诱导率分别为 41.11%、43.33%、51.11%。品种’Little Rock’为 MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.3mg/L+TDZlmg/L,诱导率为 22.22%。(3)四个品种盆栽小菊 ’Chrystal Pink’、’Rainbow Worth’、’Chrystal Bronze’、’Little Rock’最佳继代增殖培养基均为MS+6-BA0.6mg/L+NAA0.05mg/L+TDZ0.1mg/L。将盆栽小菊’Chrystal Pink,品种继代增殖培养基中细胞分裂素含量减半,玻璃化率降低到21.11%。综合玻璃化率与增值率两方面因素来看,蔗糖浓度提升到50g/L有利于改善玻璃苗增殖。(4)盆栽小菊品种 ’Chrystal Pink’、’Rainbow Worth’、’Chrystal Bronze’ 最佳生根培养基为MS+NAA0.2。’Little Rock’品种的最佳生根培养基为MS培养基。(5)蔗糖浓度为50 g/L时,开花率高,花期长。培养基中添加0.1mg/L的NAA开花率达到52.23%-65.56%。添加 0.1mg/L6-BA 开花率为 17.76%-28.89%。添加 0.5mg/LTDZ 诱导开花率为31.11%-37.78%。0.5mg/LKT对试管开花作用明显,开花率达到39.89%-43.23%。在MS培养基中添加1.0mg/LGA3时开花率达到39.89%-43.33%。
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