花桑寄生多糖分离、纯化及抗肿瘤活性的研究

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红花桑寄生(Scurrula parasitica L.)是我国南方地区常见的一种桑寄生科植物。前期的研究表明红花桑寄生总黄酮具有良好的体内外抗肿瘤效果。红花桑寄生的同科植物槲寄生(Viscum album L.)在欧洲是一种传统的抗肿瘤植物药,其提取物具有细胞毒、免疫调节等多种抗癌功效,已作为化疗药物的辅助治疗剂常规地用于癌症临床治疗。因此本文研究了红花桑寄生多糖的分离纯化方法、部分理化性质、单用及与环磷酰胺联用的体内抗肿瘤效果,并对其抗肿瘤作用的机制进行了初步探讨。采用单因素及正交实验法确立了提取红花桑寄生多糖(SP)的最佳提取工艺条件和最佳醇沉条件,粗多糖经过DEAE-SephadexA-25柱层析分离,Sephadex G-100凝胶柱层析纯化,得2个主要组分SPⅢ、SPⅣ。应用纯度鉴定、紫外光谱(UV)、红外光谱(IR)等方法分析了多糖的部分理化性质和主要结构特征。建立S180小鼠移植瘤模型检测了SP的体内抗肿瘤作用和对免疫器官重量的影响;选取SP抗肿瘤效果的最佳剂量100 mg/kg.d与环磷酰胺联用,检测SP对环磷酰胺的增效减毒效果。结果表明,SP对S180肉瘤有显著的抑制作用,提高荷瘤小鼠的脾脏指数和胸腺指数;对环磷酰胺具有显著的协同作用;SP能显著改善环磷酰胺对免疫系统的抑制作用,具有明显的减毒作用。采用免疫组织化学方法检测了S180肉瘤组织中Ki-67、CyclinD1、Bax、Bcl-2等蛋白的表达水平,图像分析系统进行累积光密度的测定,量化蛋白的表达,探讨SP抗肿瘤作用的机制。结果表明,SP抗肿瘤的机制之一是通过下调肿瘤组织中Ki-67、CyclinD1、Bcl-2蛋白的表达,上调Bax的表达,从而抑制瘤细胞的分裂,促进肿瘤细胞的凋亡,抑制肿瘤生长。
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