背景与目的:皮肤黑素瘤是一种侵袭性强、易早期转移和复发的高度恶性肿瘤,预后极差。近年来,以免疫检查点抑制剂为代表的免疫治疗极大提高了黑素瘤患者的生存率。然而,免疫治疗仍广泛存在着药物耐受、抵抗和疗效差的问题。研究表明,肿瘤免疫抑制性微环境的形成参与了免疫治疗的耐受和抵抗,促进肿瘤的侵袭转移。因此,深入探究黑素瘤免疫抑制性微环境的形成机制并寻找相应的干预靶点是目前亟需解决的关键问题。肿瘤相关巨噬细胞是肿瘤微环境中比例极高的免疫细胞。研究发现,肿瘤相关巨噬细胞在黑素瘤中具有免疫抑制功能,主要表现为M2型,并与黑素瘤患者的不良预后显著相关。然而,黑素瘤微环境调控肿瘤相关巨噬细胞表型和功能的机制尚未探索清楚。TREM2（Triggering Receptor Expressed On Myeloid Cells 2,TREM2）是一种与多种配体互作的表面受体,能够调控小胶质细胞和巨噬细胞的脂质代谢。研究发现,肿瘤组织中的M2型巨噬细胞表面TREM2广泛表达上调。阻断TREM2的表达可抑制多种肿瘤进展,增强肿瘤免疫应答。近年来,研究发现脂质代谢对于维持肿瘤微环境中免疫细胞的抑制性功能极为重要。TREM2能否调控巨噬细胞的脂质代谢进而影响其极化的机制仍缺乏探索。因此,针对上述问题,本课题利用黑素瘤模型鼠和体外细胞实验探究TREM2在黑素瘤中通过影响脂质代谢调控肿瘤相关巨噬细胞极化进而促进肿瘤进展的具体机制,旨在丰富黑素瘤免疫抑制性微环境形成的理论基础,并为以肿瘤相关巨噬细胞为靶点的免疫治疗提供思路。方法:（1）构建黑素瘤模型鼠探究黑素瘤模型鼠进展不同时期肿瘤免疫微环境的变化情况。（2）在黑素瘤模型鼠进展不同时期检测肿瘤组织局部巨噬细胞表面TREM2的表达情况,以及TREM2+巨噬细胞的表型。（3）体外检测不同亚型巨噬细胞的TREM2表达和脂质沉积情况。（4）体外使用siRNA（Small interfering RNA,siRNA）敲低M2型巨噬细胞中TREM2后,检测M2型巨噬细胞表型相关分子的表达水平并探究TREM2对M2型巨噬细胞免疫抑制性功能的影响。（5）体外探究TREM2对M2型巨噬细胞脂质代谢相关分子的影响。结果:（1）随黑素瘤进展,肿瘤组织局部免疫抑制相关分子ARG1（Arginase1,ARG1）、PD-L1（Programmed cell death-ligand 1,PD-L1）和TREM2的基因表达水平升高,且局部招募巨噬细胞的趋化因子如CCL2（Chemokine[C-C motif]ligand 2,CCL2）、CXCL12（Chemokine[C-X-C motif]ligand 12,CXCL12）和CXCR4（C-X-C motif chemokine receptor 4,CXCR4）基因表达水平升高。（2）随黑素瘤进展,肿瘤组织局部TREM2+巨噬细胞的比例明显增加。TREM2+巨噬细胞高表达免疫抑制性标记CD206（Macrophage mannose receptor,MMR）和PD-L1。（3）体外诱导的M2型巨噬细胞高表达TREM2,脂质沉积丰富。（4）siRNA敲低M2型巨噬细胞中的TREM2后,M2型巨噬细胞的典型表型相关分子ARG1、Mrc1（Mannose receptor 1,Mrc1）、Ym1（Chitinase 3-like 3,Ym1）、TGF-β（Transforming growth factor-β,TGF-β）、IL-10（Interleukin-10,IL-10）均表达下调。M2型巨噬细胞对T细胞的抑制作用减弱。（5）siRNA敲低M2型巨噬细胞中的TREM2后,M2型巨噬细胞中脂质代谢相关分子FASN（Fatty acid synthase,FASN）、FABP4（Fatty acid-binding protein 4,FABP4）和FABP5（Fatty acid-binding protein 5,FABP5）的基因及蛋白表达水平均显著下调。结论:随黑素瘤免疫抑制性微环境的进展,TREM2+巨噬细胞浸润增加,且高表达CD206和PD-L1,表现为免疫抑制表型。体外诱导抑炎的M2型巨噬细胞高表达TREM2,脂质沉积丰富。TREM2能够促进巨噬细胞的M2极化,介导M2型巨噬细胞的脂质代谢,并可能通过脂质代谢参与M2型巨噬细胞免疫耐受表型和功能的形成。