Notch1信号通路介导SASH1基因抑制乳腺癌的转移

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目的 探究抑癌基因SASH1抑制乳腺癌转移的作用机制及Notch1信号通路在其中的作用。方法 将已经构建的人SASH1真核表达载体pcDNA3.1(+)-SASH1,转染进人乳腺癌细胞中,通过G418筛选建立SASH1基因过表达的人乳腺癌SASH1稳定表达细胞系,以转染空载体作为对照组。利用RT-qPCR、Western Blot方法验证稳定表达细胞系中SASH1的mRNA和蛋白表达水平。应用Western blot和RT-qPCR检测细胞信号通路Notch1相关基因的表达,以判定其活化状态。通过细胞划痕实验,检测过表达组和对照组细胞的迁移能力。并利用Kaplan-Meier数据库,进行SASH1基因表达高低对乳腺癌患者生存期的影响。结果 成功获得人SASH1过表达的乳腺癌MCF7和MDA-MB231稳定表达细胞系。过表达组和对照组乳腺癌细胞迁移能力,划痕实验24小时,两组细胞差距无统计学意义。48小时,SASH1高表达组距离较对照组分别宽`x=1.4mm和`x=1.7mm;具有统计学意义(p<0.05)。SASH1过表达后,Notch1的表达下降,表明SASH1抑制Notch1信号通路。Kaplan-Meier数据库显示,SASH1基因高表达组的生存期比低表达组长(HR=0.78)。结论 SASH1基因可抑制乳腺癌转移;SASH1抑制乳腺癌转移的途径可能是通过调控Notch1信号通路发挥作用。本研究为阐明SASH1在乳腺癌中的作用及其机制提供了新的实验数据。图4幅;表0个;参74篇。
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