牙龈卟啉单胞菌脂多糖对成骨细胞—破骨细胞间EphB4-ephrinB2双向传导信号的影响

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骨的吸收与重建是一个重要且复杂的生命过程,而在其过程中常伴有多种偶联及信号传导机制。目前越来越多的学者立足于EphB4-ephrinB2介导的双向信号传导在骨稳态中的作用。而牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Pg-LPS)作为牙周病致病菌的主要毒力因子,在导致牙槽骨局部骨稳态的失衡而致其骨吸收方面起非常重要的作用。但目前有关Pg-LPS对EphB4-ephrinB2受体配体家族作用的研究较少。为探讨牙槽骨吸收的关键因子脂多糖对成骨细胞-破骨细胞间的EphB4-ephrinB2双向信号传导通路作用,本实验拟在体外建立小鼠颌骨成骨细胞-破骨细胞共育体系,采用RT-PCR、Western blot、免疫荧光等方法,观察脂多糖介导下破骨细胞和成骨细胞间EphB4-ephrinB2信号分子在基因水平和蛋白水平表达的特点,阐明EphB4-ephrinB2双向信号通路调控下引起牙槽骨局部骨稳态失衡的分子机制,将为牙周病防治提供新思路。主要得出以下结论:1.经破骨细胞细胞液诱导4-5天后RAW264.7单核/巨噬细胞细胞系表达ephrinB2配体蛋白;2.75ng/ml LPS对成骨细胞-破骨细胞间的EphB4-ephrinB2双向传导信号中的正向信号传导有促进作用;3.75ng/ml LPS对成骨细胞-破骨细胞间的EphB4-ephrinB2双向传导信号中的负向信号传导无明显作用或轻微抑制作用。并验证以下结论:1.可通过骨组织块贴壁法联合酶消化法由新生小鼠下颌骨中提取出成骨细胞;2.经过破骨细胞诱导液诱导RAW264.7单核/巨噬细胞细胞系可得到大量成熟破骨细胞。
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