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长叶红砂(Reaumuria trigyna)是内蒙古东阿拉善-西鄂尔多斯地区特有的泌盐盐生小灌木,具有独特的适应盐渍荒漠环境的形态特征和生理调控机制,是研究植物耐盐机理、获得耐盐优异基因的良好材料。WRKY转录因子作为一个重要的响应非生物胁迫的转录因子家族,在植物抵抗逆境胁迫中发挥着十分重要的作用。本文从长叶红砂转录组高通量测序数据库中筛选WRKY转录因子成员,分析长叶红砂中WRKY转录因子在人工逆境胁迫下的表达情况,并对2个长叶红砂WRKY转录因子进行了克隆和功能鉴定。研究结果如下：1.对长叶红砂转录高通量测序结果进行筛选,得到了67条长叶红砂WRKY转录因子的Unigene片段,比对结果显示,其中23条与数据库中毛白杨WRKY转录因子家族成员具有相似性。2.从67条长叶红砂WRKY转录因子的Unigene片段中选出10条基因,对其在人工模拟的盐、冷、干旱和ABA胁迫下的表达情况进行研究,发现10条基因都受盐胁迫和冷胁迫诱导表达,而分别有8条和7条基因受干旱和ABA诱导表达。3.利用RACE技术,克隆得到了2条长叶红砂WRKY基因,分别命名为RtWRKY1和RtWRKY23,序列分析显示它们分属于第Ⅰ类和第Ⅱ类WRKY转录因子。RtWRKY1与拟南芥WRKY1的相似度为69%; RtWRKY23与拟南芥WRKY23的相似度为40%。聚类分析表明长叶红砂RtWRKY1与拟南芥、油菜、毛白杨等物种的WRKY基因同源性较高,而RtWRKY23与马铃薯、辣椒、大豆的WRKY基因同源性较高。4.长叶红砂RtWRKY1和RtWRKY23基因表达具有组织特异性,RtWRKY1只在茎中表达,而RtWRKY23不但在茎中表达,在根和叶中也有微量表达。5.对RtWRKY1和RtWRKY23基因产物的亚细胞定位研究发现,这2条基因编码的蛋白均定位于细胞核,在细胞核中通过与靶基因的特异性结合来调控下游靶基因的表达。6.构建了真核表达载体pMETα-RtWRKY,为在酵母中的异源表达及功能鉴定奠定基础。