阳离子脂质体对阴离子型聚电解质阴离子敏感,对带负电荷的DNA有较高的转运能力,还能转运RNA、核糖体及其他大电荷的分子和大分子物质进入细胞,其转运效率比其它脂质体高出许多倍,因而被广泛应用于基因转移技术中。但是阳离子脂质体与病毒载体相比,具有转运效率较低,细胞毒性大等缺点。本实验在合成的阳离子类脂中加入不同助剂制备成复合型非病毒基因载体,以期提高转运效率,降低细胞毒性。本实验从复合型非病毒载体的物化性质与生物性能两个方面研究它以及其DAN复合物的结构、粒径、表面形态等与转运效率、细胞毒性的关系,以便为提高转运效率提供研究依据。主要包括琼脂糖凝胶电泳分析复合物型非病毒载体与质粒pGFP-N2(报告基因)DNA的结合能力,以商品试剂Lipofectamine2000和DOTAP为对照,利用脂质体/DNA复合物转染Hep-2细胞,荧光显微镜观察其基因转染效率,利用MTT法评价转染试剂的毒性。琼脂糖凝胶电泳结果表明:在阳离子脂质体中加入少量或等量DOPE,延滞DNA能力增强,DOPE量多时反而减弱;用蔗糖酯修饰的阳离子脂质体延滞能力变化不明显;加入壳聚糖脂质体,延滞DNA的能力明显增强。原子力显微镜结果显示,商品试剂Lipofectamione2000与DOTAP在云母片上形成的颗粒为球形或椭圆形,粒径分布较为均匀,而复合型阳离子脂质体的粒径分布不均;阳离子脂质体/DNA复合物在云母片上的颗粒形状不规则,粒径分布不均且比空白脂质体的粒径大。加入蔗糖酯与DOPE后,转染效率升高;壳聚糖修饰的脂质体转染效率明显提高。但MTT毒性显示,加入DOPE与壳聚糖的脂质体毒性降低,而加入蔗糖酯的脂质体毒性增高。