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目的： 当今社会高压力、快节奏的生活模式使得现代女性容易产生焦虑、抑郁等不良情绪，诸多不良情绪作为应激原，诱发心理应激，进而导致女性生殖内分泌系统紊乱。本实验作为国家青年科学基金项目(编号：81603650)的子课题，将中医“情志致病”理论与现代医学“心理应激”理论相结合，旨在通过建立肝郁-心理应激小鼠模型，观察小鼠动情周期变化、心理应激血清学相关指标变化、血清性激素水平变化以及光镜下卵巢组织形态学变化，从而研究不同程度肝郁-心理应激对小鼠下丘脑-垂体-肾上腺(Hypothalamic-pituitary-adrenal，HPA)轴中应激激素水平以及卵巢储备功能的影响，借此以中西医多角度探讨肝郁-心理应激与女性卵巢储备功能的相关性。 方法： 采用健康雌性未孕ICR小鼠80只，平均体重为22-26g，周龄为4-5周，SPF级。随机分为4组，每组各20只。正常组，不给予任何干预。除正常组外，其余三组按照肝郁-心理应激模型制备方法，给予不同程度刺激，连续4周，制造肝郁-心理应激小鼠动物模型，分别为肝郁-心理应激强刺激组、中刺激组、弱刺激组，于处死前一周连续行阴道脱落细胞涂片，于光镜下观察，以监测各组小鼠动情周期的变化；于末刺激24 h后，检测各组小鼠血清中促肾上腺皮质激素释放激素(Corticotropin releasing hormone，CRH)、促肾上腺皮质激素(Adrendcorticotrophic hormone，ACTH)、皮质酮(Corticosterone，CORT)水平以及血清中促卵泡生成素(Follicle stimulating hormone，FSH)、促黄体生成素(Luteinizing hormone，LH)、雌二醇(Estradiol，E2)、抗苗勒氏管激素(Anti-mullerian hormone，AMH)水平变化，并在光镜下观察各阶段卵泡及其闭锁情况，从而研究不同程度肝郁-心理应激对小鼠HPA轴应激激素水平以及卵巢储备功能的影响。 结果： 1.各组小鼠动情周期的变化结果 正常组小鼠动情周期规律。与正常组小鼠相比，强刺激组及中刺激组小鼠动情周期严重紊乱；弱刺激组小鼠动情周期轻度紊乱。 2.各组小鼠心理应激血清学相关指标CRH、ACTH及CORT水平结果 与正常组小鼠相比，强刺激组、中刺激组、弱刺激组小鼠血清CRH、ACTH及CORT水平均升高，差异存在统计学意义(P<0.01)。组间两两比较显示，随着刺激强度的增加，小鼠血清中CRH、ACTH、CORT的水平逐渐升高，差异存在统计学意义(P<0.01)。 3.各组小鼠血清性激素水平结果 3.1各组小鼠血清中促卵泡生成素(FSH)水平结果 与正常组小鼠相比，强刺激组、中刺激组、弱刺激组小鼠血清FSH水平均下降，差异存在统计学意义(P<0.01)；组间两两比较显示，随着刺激强度的增加，小鼠血清中FSH水平逐渐降低，差异存在统计学意义(P<0.01)。 3.2各组小鼠血清中促黄体生成素(LH)水平结果 与正常组小鼠相比，强刺激组、中刺激组、弱刺激组小鼠血清LH水平均下降，差异存在统计学意义(P<0.01)；组间两两比较显示，随着刺激强度的增加，小鼠血清中LH水平逐渐降低，差异存在统计学意义(P<0.01，P<0.05)。 3.3各组小鼠血清中雌二醇(E2)水平结果 与正常组小鼠相比，强刺激组、中刺激组、弱刺激组小鼠血清E2水平均下降，差异存在统计学意义(P<0.01)；组间两两比较显示，随着刺激强度的增加，小鼠血清中E2水平逐渐降低，差异存在统计学意义(P<0.01，P<0.05)。 3.4各组小鼠血清中抗苗勒氏管激素(AMH)水平结果 与正常组小鼠相比，强刺激组、中刺激组、弱刺激组小鼠血清AMH水平均下降，差异存在统计学意义(P<0.01)；组间两两比较显示，随着刺激强度的增加，小鼠血清中AMH水平逐渐降低，差异存在统计学意义(P<0.01，P<0.05)。 4.各组小鼠卵巢组织形态学变化结果 (1)正常组：卵巢体积大，皮髓质结构清晰，其内可见原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡、窦前卵泡、窦卵泡；黄体细胞丰富；卵泡液含量多，颗粒细胞层次丰富，卵丘形态正常。 (2)强刺激组：卵巢体积萎缩明显，原始卵泡几乎未见，各级卵泡数量明显减少，卵泡液含量减少，卵丘变形或消失，闭锁卵泡数量增多。 (3)中刺激组：卵巢体积萎缩，各级卵泡数量减少，可见部分闭锁卵泡。 (4)弱刺激组：卵巢体积略有萎缩，卵泡生长稍减少，可见少量闭锁卵泡。结论： 1.肝郁-心理应激可导致小鼠动情周期出现紊乱；并且肝郁-心理应激程度越重，小鼠动情周期紊乱情况越严重。 2.肝郁-心理应激可导致小鼠血清CRH、ACTH及CORT激素分泌增多，机体处于心理应激状态；并且肝郁-心理应激程度越重，三种激素的分泌水平越高，小鼠心理应激状态越明显。 3.肝郁-心理应激可导致小鼠血清FSH、LH及E2分泌减少，AMH水平下降，闭锁卵泡数增多，各级生长卵泡减少，导致卵巢储备功能降低；并且肝郁-心理应激程度越重，性激素分泌水平越低，闭锁卵泡越多，卵巢储备功能下降越明显。 4.肝郁-心理应激通过影响小鼠生殖-内分泌系统，致使性激素分泌紊乱，卵泡发育异常，引起卵巢储备功能下降，从而影响小鼠生殖功能。