Mir-665靶向BRD4对脉络膜黑色素瘤细胞负向调控作用机制研究

来源 :南昌大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dv_lover
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目的:本课题主要致力于探讨mi R-665对脉络膜黑色素瘤细胞的增殖能力调控的影响,并且研究BRD4基因在脉络膜黑色素瘤细胞中表达情况,及mi R-665靶向BRD4对脉络膜黑色素瘤细胞负向调控作用机制,为脉络膜黑色素瘤的临床治疗提供新的靶点。方法:Western Blot技术检测BRD4在脉络膜黑色素瘤细胞内的表达水平。Real-Time PCR实验检测mi R-665或BRD4在细胞内的表达水平。采用慢病毒感染的方法在C918细胞内敲低BRD4基因构建稳转株,采用质粒转染构建能高表达BRD4的C918细胞。利用Real-Time PCR和Western Blot检测细胞内BRD4的m RNA和蛋白水平的变化。MTT实验检测mi R-665或BRD4对C918细胞增殖作用影响。transwelll实验和侵袭实验检测mi R-665或BRD4对C918细胞迁移和侵袭作用影响。流式细胞仪对细胞凋亡进行检测。结果:过表达mi R-665能有效抑制C918细胞的生长增殖,反之促进C918细胞的生长增殖,通过实验证明过表达mi R-665能有效抑制BRD4的表达,并且过表达BRD4能促进C918细胞的生长增殖,反之抑制细胞生长,在低表达BRD4的C918细胞中抑制mi R-665的作用能缓解低表达BRD4对细胞的抑制作用。结论:我们的研究结果显示mi R-665或BRD4在脉络膜黑色素瘤细胞的增殖中发挥着重要作用。过表达mi R-665或敲低BRD4都能抑制脉络膜黑色素瘤细胞的生长增殖,并且mi R-665能靶向调控BRD4,综合研究表明,mi R-665能通过负向调控BRD4的表达来抑制脉络膜黑色素瘤细胞的生长增殖。本研究为靶向mi R-665或BRD4基因治疗脉络膜黑色素瘤奠定了基础。
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