【摘 要】
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该实验采用聚乙二醇(分子量6,000)修饰SOD,对修饰的SOD的耐热、耐酸碱和抗酶解的稳定性进行研究.为了对比天然SOD与修饰后SOD在动物体内的代谢过程,将两者对家兔进行灌胃.然
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该实验采用聚乙二醇(分子量6,000)修饰SOD,对修饰的SOD的耐热、耐酸碱和抗酶解的稳定性进行研究.为了对比天然SOD与修饰后SOD在动物体内的代谢过程,将两者对家兔进行灌胃.然后进行细胞杀伤试验和细胞凋亡试验,从整体水平和细胞水平上验证修饰后的PEG-SOD重现了SOD的生物功效.采用了氰脲酰氯的方法活化聚乙二醇,修饰SOD.在不同温度、不同pH缓冲液以及胃蛋白酶和胰蛋白酶作用的条件下,修饰后PEG-SOD的稳定性.结果表明PEG-SOD比天然SOD具有更好的稳定性.为了区分血样中原形物与代谢小分子,该实验采用了<125>I标记示踪与聚丙烯酰胺凝胶电泳相结合的方法,有效地将原形物和代谢小分子分开,以满足实验要求.将标记好的SOD和PEG-SOD分别对家兔进行灌胃,于不同的时间点取耳缘静脉血.用电泳方法处理样品后,检测样品中原形物的放射性计数.在血液中检测到放射性计数,并且血液中SOD活性上升,证实了PEG-SOD的原形物可以被吸收利用.并且所吸收的SOD主要是存在于血浆中,红细胞中存在的量较少.相比之下,PEG-SOD的达峰时间较SOD推迟,峰值也低于SOD组.
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