水稻纹枯病生防用木霉菌分离鉴定及生防机理研究

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本文采用稀释涂布平板法从不同植物根际土样中分离纯化出20株木霉菌菌株,通过室内平板对峙培养试验得出D1菌株对水稻纹枯病菌的抑制作用较强,抑菌率达80.82%;通过发酵浓缩液对水稻纹枯病菌的抑菌试验得出D1菌株发酵浓缩液对水稻纹枯病菌的抑菌作用较强,抑菌率达69.55%。综合研究结果筛选出D1菌株作为水稻纹枯病生防用木霉菌,经形态学和分子学初步鉴定D1菌株为短密木霉(Trichoderma brevicompactum)。将D1菌株与8种植物病原菌进行对峙实验后得出D1菌株对8种植物病菌均具有较强的抑菌作用,抑菌率在63.03%~95.18%之间。在20~30℃和pH 4~5时D1菌株对水稻纹枯病菌的抑菌效果最好,抑菌率分别为76.15%~80.70%和78.57%~78.77%。供试5种杀菌剂对D1菌株菌丝生长毒力不同,其EC50值为0.042~384.24 mg/L,但田间常用浓度下抑菌率均较高,为75.8%~100%。从D1菌株对水稻纹枯病的盆栽防病试验得出D1菌株不仅不会引起稻株发病,对水稻植株是安全的,还增加水稻的产量,与无菌水处理相比提高了 27.41%,对水稻的生长有一定的促进作用;D1菌株对水稻纹枯病的防治效果在51.09%~70.64%之间,其中先用D1菌株处理24 h后接病菌的防效最高,其次是同时接菌处理,先接病菌24 h后用D1菌株处理的防效最低;使用病菌和D1菌株处理的结实率、千粒重和产量显著高于只接病菌处理,减少产量损失率为54.55%~96.37%;D1菌株对水稻纹枯病有预防和治疗作用,其中预防作用优于治疗作用。从D1菌株的生防机理研究结果得出D1菌株对水稻纹枯病菌具有抗生、竞争、重寄生作用,并能诱导稻株抗性和促进稻株增产作用。D1菌株发酵浓缩液抗生活性物质对热有较高的稳定性,喜微酸环境,在强碱性环境下易被破坏,并且不具有挥发性。只接水稻纹枯病菌能诱导稻株体内防御酶活性增加,但病菌和D1菌株处理能降低稻株体内的防御酶活性,但仍高于只接D1菌株和无菌水处理的对照的防御酶活性。D1菌株不能单独提高水稻叶片内叶绿素含量,能提高接水稻纹枯病菌的水稻叶片叶绿素含量,但不超过不接病菌的对照。D1菌株在25~30℃、pH 6~8和PDA浓度为75%~100%生长最快,在25℃、pH 7和PDA浓度100%产孢最多。D1菌株在不同单因素条件下发酵后与水稻纹枯病菌进行对峙实验后得出最佳发酵时间为3d,温度为25℃,装液量为100 mL(250 mL),初始pH值为原始pH即6.2,转数为160 r/min,碳源为葡萄糖2.43%,氮源为蛋白胨0.32%,无机盐为硫酸镁0.13%。
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