小麦是世界上主要的粮食作物之一,也是甜工作物,随着人口、温度和土壤盐渍化的增加,提高小麦的产量成为亟待解决的问题。在非生物胁迫下,蛋白质的错误折叠/不折叠会不断堆积引发内质网应激（ER Stress）。我们前期的研究发现,小麦Sep15-like-B能缓解拟南芥ER Stress响应盐/旱胁迫。本文主要利用小麦过表达体为材料,研究TaSep15-like-B响应NiSO4、NaCl和PEG6000胁迫的生理及分子机制。前期李晴晴（2017）已经初步分析了小麦TaSep15-like-B的基本特点,它定位在内质网中,在根茎叶中都有表达,且无明显的组织特异性;能被盐、渗透胁迫所诱导,能在拟南芥中调控内质网应激响应盐和渗透胁迫。在本研究中,我们发现TaSep15-like-B也能被镍诱导,在75和150μMNiSO4的胁迫处理下,相比于野生型,拟南芥AtOE系的根长和叶面积显著增加;利用200μM NiSO4处理小麦过表达体得到一致的结果,以上结果表明TaSep15-like-B过表达能增强拟南芥和小麦对镍的抗性。在200 mM NaCl、15%PEG处理三叶期的过表达体小麦幼苗48 h,结果发现,相比于野生型,TaOE系的主根长、叶面积及鲜重显著增加,这表明过表达TaSep15-like-B能提高小麦对盐和渗透胁迫的抗性。在各种胁迫下,与野生型相比,TaOE中内质网通路的UPR marker基因的表达发生了相应的显著变化,这表明TaSep15-like-B可能参与了 ER stress的调控;在不同胁迫处理下,TaOE系中蛋白总羰基含量显著低于YM20,而蛋白总巯基的含量却显著高于野生型,这进一步表明TaSep1 5-like-B能在ER stress的调控中发挥重要作用。相比于野生型,在镍、盐和渗透胁迫处理下,TaOE系中ROS的积累显著降低,与此一致的是ROS产生/清除基因及酶活发生了相应的显著变化,这表明TaSep15-like-B参与了氧化还原平衡的调节。在二硫苏糖醇（DTT）和衣霉素（TUN）处理下,TaOE和野生型小麦均表现为ER stress的增加和ROS的积累,但过表达小麦积累更少的ROS,这说明ER stress可以直接诱导ROS的积累。动物、玉米中Sep15的同源蛋白能够与UDP-葡萄糖:糖蛋白葡糖基转移酶（UGGT）互作,参与了内质网中N-糖蛋白的质量控制过程。小麦基因组中有8个UGGT基因,含有典型的UGGT功能结构域。通过Y2H、BiFC、LCA实验证实了 TaSep15-like-B与TaUGGT-B2之间存在物理互作。此外,我们还通过酵母双杂交筛选小麦cDNA文库,发现了潜在的候选互作蛋白TaBgl-D。生物信息学和文献表明,该蛋白定位在内质网,在蛋白质质量控制中负责葡糖基的去除。经Y2H、LCA实验发现它们不存在直接互作关系。不过,经生物信息学、Y2H和LCA分析发现TaBgl-D与TaUGGT-B2蛋白可能存在互作,因而我们推测TaSep15-like-B、TaUGGT-B2、TaBgl-D三者形成异三聚体,在糖蛋白质量控制中发挥重要作用。综上,本文的结果初步表明TaSep15-like-B和TaBgl-D可通过TaUGGT-B2互作,通过调控内质网糖蛋白质量控制响应不同的逆境胁迫,该结果有助于我们理解小麦的抗逆基础,并为小麦的抗逆育种提供可用基因源。