E8.5d小鼠神经管来源的神经上皮细胞microRNAs的表达谱分析

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目的:微RNAs(microRNAs)是一类长度为22nt左右的内源性非编码单链小RNAs,在物种间具有高度保守性,时序性和组织特异性,它们与靶mRNA分子互补结合抑制蛋白翻译或导致mRNA降解,发挥负性调节作用,参与细胞、组织分化发育的调控。我们的研究旨在发现调控神经发生的一些microRNAs并探寻其分子机制,为脊髓损伤后的神经再生分子机制提供理论依据及可能的治疗靶点,并为开发和设计基于microRNAs促进神经再生的基因工程药物提供新思路。方法:选择E8.5d和E9.5d小鼠胚胎神经管,应用免疫荧光染色以及流式细胞术检测小鼠胚胎神经管中巢蛋白(Nestin)的表达。利用microRNAs芯片,分析E8.5天小鼠胚胎神经管来源的神经上皮细胞microRNAs表达谱。然后利用生物信息学方法(http://pictar.bio.nyu.edu, http://www.targetscan.org )筛选相关的microRNAs并进行分析和功能预测。结果:免疫荧光染色显示E8.5d小鼠胚胎神经管几乎全层都表达Nestin,E9.5d小鼠胚胎神经管几乎不表达Nestin;E8.5d胚胎神经管经流式细胞学检测Nestin阳性细胞率为58.2±3%,E9.5d的为7.58±3%。E8.5天小鼠胚胎神经管来源的神经上皮细胞microRNAs芯片显示有74个上调的microRNAs,和65个下调的microRNAs。其中一些microRNAs的靶基因是和神经系统发育相关的。例如miR-367、miR-26b、miR-10b、miR-219和-199*等。结论:microRNAs在体内早期神经系统发育中可能发挥了重要的作用。
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