【摘 要】
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本研究利用传染性法氏囊病病毒VP3蛋白的四株单克隆抗体(VP3-3F,VP3-7B,VP3-7C和VP3-10E)对噬菌体随机15肽库进行了3轮筛选,得到了8个模拟表位,在竞争抑制ELISA中模拟表位与单抗
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本研究利用传染性法氏囊病病毒VP3蛋白的四株单克隆抗体(VP3-3F,VP3-7B,VP3-7C和VP3-10E)对噬菌体随机15肽库进行了3轮筛选,得到了8个模拟表位,在竞争抑制ELISA中模拟表位与单抗的反应可被VP3蛋白竞争抑制。为了更进一步详细研究IBDVVP3表位结构,本研究设计表达了一组总数为17个部分重叠且覆盖VP3全长的短肽融合蛋白,利用肽扫描技术对这四株IBDV VP3的单克隆抗体针对的抗原表位进行了研究,鉴定出了两个新的VP3线性表位:109-119aa(多聚蛋白的864-874aa)(针对VP3-3F和VP3-7B),177-190aa(多聚蛋白的932-945aa)(针对VP3-7C和VP3-10E)。同源性分析结果显示,这两个表位在多种血清Ⅰ型(除变异株Variant E)和血清Ⅱ型毒株中同源性为100%,是IBDV保守的群特异性表位。这两个表位具有良好的免疫原性和反应原性,说明这两个表位可以作为制备多表位疫苗和诊断试剂的候选肽段。利用肽扫描技术对三株IBDV VP2的单克隆抗体的抗原表位进行了定位,在VP2高变区侧翼鉴定出了一个新的线性抗原表位:187-199aa。同源性分析结果显示,该表位仅在血清Ⅱ型OH毒株中有变异(1187A、M193L、V194M),说明这个表位是保守的型特异性抗原表位。该研究将有助于进一步阐明VP2、VP3蛋白抗原结构,探讨其表位生物学功能,对设计科学合理的疫苗和诊断试剂具有重要的意义。
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