化学发光免疫分析将高特异性的免疫分析反应和高灵敏的化学发光技术相结合,因而具有高灵敏性,高选择性,低成本等优点,且能够结合自动化程序和传感器技术,成为临床诊断、科学研究、生物分析、食品安全等领域一种应用广泛的检测手段。传统的免疫分析方法一般需要2-3步甚至更多步骤反应,期间更需要繁琐的冲洗、干燥等过程,大大地延长了分析的时间并增加了操作的复杂性,非常不利于检测通量的提高。邻位诱导策略利用DNA辅助蛋白检测的方法,将对于大分子蛋白的检测转换为对核酸的检测,结合各种成熟的核酸放大策略,大大提高了检测的灵敏性。本论文关注邻位诱导策略在化学发光免疫分析中的应用,围绕均相一步分析法建立和多组分化学发光成像方法,开展了以下工作：1.邻位杂交效应调控化学发光能量转移(CRET)效率的方法用于均相免疫分析化学发光共振能量转移和邻位连接技术广泛用于生物分析传感器,在此,我们提出了一种采用邻位触及反应调控化学发光共振能量转移的免洗均相分析技术用于检测CEA抗原。在H202存在时,TCPO被氧化至激发态,与Cy5之间发生能量转移从而使Cy5释放出强烈的化学发光信号。猝灭性能良好的氧化石墨烯能与Cy5标记的DNA3发生CRET,使化学发光几乎不发生,实现‘’Signal off"的信号转变。而CEA的加入则诱导邻位触及反应发生,形成邻位复合物,使Cy5标记的DNA3与GO脱离,抑制CRET过程。此外,通过利用核酸内切酶Nt.BbvCI进行原位循环,可进一步放大信号,实现高灵敏度的CL检测。实验结果显示,该方案能实现对CEA的特异性响应,检测范围可达5个数量级,检测限为3.2pg/mL。该方法不仅操作简单,灵明度高,准确可靠,而且仅需要0.3 μL的样品,具有极高的商业应用性。2.基于邻位诱导效应的化学发光免疫微阵列构建多组分免疫分析和传感器阵列分析具有通量高、所需时间短、样品消耗少、分析成本低等优点,因而在肿瘤标志物的筛查和定量测定方面意义重大。但由于化学发光信号常常很微弱,难以构建免疫微阵列,在蛋白质微阵列领域的应用受到了限制。因发展全新的信号放大策略存在一定难度,我们亟需利用现有成熟的信号放大方式来构建化学发光免疫微阵列技术。本工作中,我们利用邻位诱导DNA组装将蛋白的检测转化为对于DNA的检测,并结合杂交链反应(HCR)信号放大策略和生物芯片制作及分析系统,构建化学发光免疫分析微阵列以实现肿瘤标志物的高通量筛查和检测。本工作的完成将对化学发光免疫微阵列的发展、恶性肿瘤的大规模筛查以及肿瘤标志物的床旁等领域具有重要的意义。