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目的:探讨甘草查尔酮A在小鼠心肌梗死后的保护效应及其作用机制。方法:1)将雄性C57BL/6J小鼠随机分为假手术组、心肌梗死手术组和低剂量(20mg/kg)、中剂量(60mg/kg)、高剂量(100mg/kg)甘草查尔酮A药物干预组以及核因子红系 2-相关因子 2(nuclearfactorerythroid2-relatedfactor2,Nrf2)特异性抑制剂ML385(溶于5%DMSO,30mg/kg)组,每组5只。采用结扎小鼠心脏冠状动脉左前降支(Left anterior descending coronary artery,LAD)的方法构建心肌梗死模型。其中,抑制剂组术前1h腹腔注射Nrf2特异性抑制剂ML385,术后三天连续给药维持药物浓度,其余处理方式同甘草查尔酮A药物干预组。2)造模3天后通过超声心动图测各组小鼠心功能后,取部分心肌组织送检,采取转录组测序的分析方式寻找可能的作用通路。应用R包edgeR对各组样本之间的差异基因进行分析,差异倍数>2倍或<0.5倍,且p<0.05定义为差异基因。使用DAVID软件对差异基因进行GO和KEGG富集分析。3)应用苏木素-伊红染色的方法,评估心梗后小鼠心肌组织的坏死程度。通过TUNEL荧光染色方法,检测心梗后各组小鼠心肌细胞的凋亡比例,并应用western blot检测小鼠心肌组织中凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达情况。4)免疫荧光法检测心肌组织活性氧(reactive oxygen species,ROS)生成,酶标法检测心肌组织中谷胱甘肽(glutathione,GSH)和丙二醛(malondialdehyde,MAD)含量,以及过氧化氢酶(catalase,CAT)活力。5)Western blot检测心肌组织总蛋白中HO-1、胞质蛋白及核蛋白中Nrf2的表达,免疫组织化学方法进一步验证心肌组织中Nrf2的表达及定位情况。结果:1)与假手术组相比,手术组小鼠心肌组织坏死显著,主要表现为心肌组织排列紊乱甚至断裂,并伴随大量炎细胞浸润。给予甘草查尔酮A(LicochalconeA,Lico A)药物干预后,各剂量组小鼠心肌组织损伤均有不同程度的减轻,其中,中剂量给药组保护效果最为显著。2)超声心动图结果显示,与假手术组相比,心梗组小鼠左心室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)和短轴缩短率(fractional shorting,FS)较假手术组明显下降,而低、中、高剂量LicoA组小鼠LVEF和FS均高于心梗组(其中高剂量给药组FS与心梗组比较无统计学意义,其余组P<0.05)。心梗组小鼠左心室舒张末期内径(left ventricular internal dimater diatole,LIVDd)较假手术组升高,Lico A中剂量组LIVDd较心梗组下降,其余剂量组与心梗组比较无统计学意义(P>0.05)。而左心室收缩末期内径(leftventricularinternal dimensionsystole,LIVDs)五组差异均无统计学意义(P>0.05)。3)通过TUNEL荧光染色法检测小鼠心肌细胞凋亡比例,结果显示,心梗组小鼠心肌细胞凋亡比例较假手术组明显增加,而低、中、高剂量LicoA组小鼠心肌细胞凋亡比例均较心梗组下降,中剂量给药组心肌细胞凋亡比例下降最为显著(P<0.05)。通过Western blot检测凋亡蛋白发现,心梗组抗凋亡蛋白Bcl-2与促凋亡蛋白Bax的比例明显下降,而药物干预后其表达水平显著升高(P<0.05)。4)检测心肌组织氧化应激情况显示,与假手术组相比,心梗组小鼠心肌组织内ROS水平明显升高,GSH含量下降、CAT活力降低和MAD含量升高(P<0.05)。Lico A干预后,心肌组织ROS水平较心梗手术组显著降低,GSH含量升高、CAT活力增加及MAD含量降低(P<0.05),其中中剂量组效果最明显。5)高通量测序在三个对照组中共筛选出1807个差异基因。信号通路分析显示差异基因主要富集于氧化应激、PPAR信号通路、AMPK信号通路等。根据DEseq结果对氧化应激通路进行的GSEA分析表明,与心梗组比较,Lico A组氧化应激水平被显著下调。6)Western blot分析显示,与假手术组相比,心梗手术组小鼠心肌组织总蛋白中血红素加氧酶(hemeoxygenase-1,HO-1)和核蛋白中Nrf2表达轻度升高,而LicoA药物组小鼠心肌组织总蛋白中HO-1及核蛋白中NRF2表达显著增高(P<0.05)。免疫组化结果表明,与假手术组相比,心梗手术组小鼠心肌细胞内未见明显Nrf2核转移,而LicoA治疗后可见Nrf2大量核内表达(P<0.05)。7)给予Nrf2特异性抑制剂ML385干预后,它可明显废除LicoA对心肌梗死小鼠的上述保护作用。结论:LicoA可通过激活Nrf2/HO-1通路来发挥抗氧化应激效应,从而有效地防止心梗后心肌的损伤。