研究背景随着年龄的增长,皮肤松弛、轮廓的改变和皱纹的形成给很多人带来困扰,如何预防和延缓皮肤老化己经成为人们关注的热点之一。在近来的几年里,皮肤美容有一种发展趋势,即微创、无创操作技术。人们寻求各种治疗手段使皮肤真皮层更新,组织结构更优,表皮恢复正常。射频紧肤是近年来发展起来的一种无创、非剥脱性的医疗美容技术。射频是一种高频交流变化的电磁波,其通“选择性电热作用”发挥其生物学效应。Richard等报道射频技术具有祛皱、改善皮肤松弛和老化、改善肤质等效果,刘丽红等对射频技术已进行了较为全面的阐述。虽然该技术已广泛用于临床,但有关射频作用机制的研究则很少报道,机理仍然不十分清楚,限制了射频技术的进一步发展及运用。本实验旨在动态观察射频技术对豚鼠皮肤组织形态及胶原含量的影响,进一步探讨射频的作用机制。研究目的本课题用射频作用豚鼠背部皮肤后,通过HE染色观察皮肤组织学的改变：用维多丽亚蓝丽春红S双重染色观察皮肤胶原纤维的改变；透射电镜观察皮肤组织显微结构；定量分析豚鼠皮肤羟脯氨酸的含量,观察皮肤胶原的变化,进一步研究射频紧肤的作用机制。研究方法选择40只豚鼠,随机将背部皮肤一侧设为射频区,另一侧设为非射频区(空白对照区),射频区采用单极射频作用豚鼠背部皮肤,功率为60W,累计能量为10KJ,每周1次共5次,对照区不进行射频等任何处理。分别于射频后即刻、1月,2月和3月后切取皮肤样本,大小约8mm×5mm×3mm。1.行HE染色、维多丽亚蓝丽春红S双重染色在光学显微镜下分别观察四组皮肤组织形态学改变,特别是胶原纤维的变化,并与非射频区相比较。2.取1mm×3-4mm的新鲜标本,制成透射电镜标本,在透射电镜下观察胶原纤维及成纤维细胞的超微结构变化,并与非射频区相比较。3.采用样品碱水解法定量检测各组射频区与非射频区皮肤中羟脯氨酸的含量,用重复测量多元方差分析进行统计学处理。结果1.光镜下观察,与对照区比较,射频电流作用后各组豚鼠表皮厚度均未见明显改变；毛细血管组织与毛囊结构完整无损伤,部分见内皮细胞肿胀。除此之外,射频即刻可见真皮层胶原排列疏松、轻微紊乱,少部分卷曲、凝聚成团；射频后1月显示真皮层胶原排列较规则；射频后2月、3月可见真皮层胶原染色不断加深,胶原纤维排列整齐、紧凑,结构致密,明显强于对照区,并可见弹性纤维和成纤维细胞增多。2.透射电镜观察电镜下观察,各组非射频区和射频区均可见成纤维细胞核膜、胞膜结构完整。即刻组射频区与非射频区比较胶原纤维轻微紊乱,成纤维细胞内质网扩张明显,部分线粒体结构模糊；与非射频区相比,射频区1月至3月胶原纤维排列逐渐致密,成纤维细胞逐渐增多,内质网轻度扩张,线粒体结构逐渐清晰并肿胀减轻。3.羟脯氨酸含量测定,即刻组射频区与非射频区比较羟脯氨酸含量无明显差别。射频区皮肤羟脯氨酸含量从1月起至3月持续高于非射频区,具有显著性差异(p＜0.001)。结论1.射频作用豚鼠皮肤后可刺激真皮胶原含量增加,胶原纤维排列致密紧凑,从而改善皮肤外观。2.射频作用豚鼠皮肤后疗效有一定的时效性,并至少能维持3个月。