真皮多能干细胞复合丝素蛋白—聚乳酸支架修复兔关节软骨全层缺损的实验研究

来源 :兰州大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:aorong
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目的:探讨真皮多能干细胞在软骨缺损修复中的可行性,为扩大软骨缺损修复中的种子细胞选择提供实验依据。真皮多能干细胞与丝素蛋白—聚乳酸支架共培养一周后植入兔膝关节软骨全层缺损处,12周后,对修复组织进行评分,及统计学分析来评价修复效果,为临床应用组织工程方法修复关节软骨缺损提供实验基础和理论依据。方法:以新生青紫蓝兔为研究对象,机械法直接分离得到真皮组织,采用酶消化法获取细胞,利用干细胞贴壁粘附生长的特性获取高克隆细胞群,并进行传代筛选。使细胞浓度达到1×10~6/ml与支架材料共培养一周后植入兔膝关节软骨全层缺损处,用3-5月龄青紫蓝兔30只,60个关节,随机分为真皮干细胞/支架材料(A组)、支架材料(B组)、空白对照(C组)三组,每组20个关节,于术后12周空气栓塞处死实验兔,取材修复组织进行取材,行HE、甲苯胺蓝染色,根据软骨缺损修复情况进行大体、组织学评分,采用SPSS10.0统计软件进行数据分析,比较各组的评分差异是否具有统计学意义。结果:大体及组织学观察显示,真皮多能干细胞/丝素蛋白—聚乳酸支架材料实验组修复组织表面光滑、呈透明样,与周围软骨及软骨下骨整合良好。而丝素蛋白—聚乳酸支架材料组有少许透明样软骨,主要以纤维软骨修复,空白对照组则表面有缺损,以纤维软骨修复。大体及组织学评分显示A组修复效果最优、优于B、C组(P<0.05),B组优于C组(P<0.05)。结论:真皮多能干细胞作为种子细胞可修复关节软骨缺损,恢复正常关节结构。
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