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目的: 通过检测习惯性流产患者外周血单核细胞B7-H3的表达及血常规炎症指标和miRNA-135a的表达,分析B7-H3、炎症指标及miRNA-135a在习惯性流产病程中的变化,为探讨习惯性流产患者的发病机制提供依据。 方法:1.按年龄和孕周相匹配的原则收集正常妊娠组(normal pregnancy,NP)30例、有流产病史现妊娠组(history of abortion with pregnancy,HAP)30例、习惯性流产组(habitual abortion,HA)50例。正常妊娠组收集标本后,随访正常妊娠组的资料直至分娩,确定是正常妊娠。 2.采用流式细胞仪检测外周血单核细胞B7-H3 ,采用酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清可溶性B7-H3 (sB7-H3),采用CBA(cytometric bead array,CBA) 方法检测血清Th1/Th2细胞因子,包括Th1 型:白细胞介素2(Interleukin 2,IL-2)、干扰素-γ(Interferon-γ,IFN-γ)和肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α),Th2型:白细胞介素4(Interleukin 4,IL-4)、白细胞介素6(Interleukin 6,IL-6)和白细胞介素10(Interleukin 10,IL-10)。 3.采用血细胞分析仪检测外周血血细胞分析,计算炎症指标中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)、血小板与淋巴细胞比值(PLR)、淋巴细胞与单核细胞比值(LMR)。 4.采用荧光定量PCR检测习惯性流产患者血清miRNA-133a、miRNA-135a。 结果: 1.HA组外周血CD14+单核细胞比例分别低于NP组和HAP组(3.474±1.538%vs 4.857±1.613%、5.409±0.867%),均有显著差异(P<0.05);HA组外周血CD14+单核细胞B7-H3的表达水平分别明显高于NP组和有HAP组(9.050±1.767%vs 1.327±0.641%、2.100±0.556%),均有显著差异(P<0.05)。妊娠女性孕周3个月、6个月、9个月分别按孕周、年龄分组,B7-H3 的表达水平没有显著差异。HA组血清 sB7-H3水平(2.700±0.130 ng/mL)和NP组(2.916±0.161 ng/mL)均高于 HAP组(2.369±0.172 ng/mL),均有显著差异(P<0.05)。 2.HAP组血清细胞因子IL-2分别高于NP组、HA组(4.572±0.419 pg/mL vs 2.504±0.751 pg/mL、3.177±1.244 pg/mL),均有显著差异(P<0.05);HA组血清细胞因子IL-2也显著高于NP组(P<0.05);HA组血清细胞因子(IL-4)低于NP组(2.730±1.666 pg/mL vs 3.500±1.395 pg/mL),有显著差异(P<0.05);HAP 组血清细胞因子 IL-6 分别高于NP组、HA组(3.808±1.153 pg/mL vs 2.689±1.004 pg/mL、2.357±1.048 pg/mL),均有显著差异(P<0.05);HAP 组血清细胞因子 IL-10 分别高于NP组、HA组(3.687±0.457 pg/mL vs 2.353±0.784 pg/mL、2.341± 1.020 pg/mL),均有显著差异(P<0.05)。 3.NP组NLR明显高于HAP组和HA组(3.877±1.250 vs 2.911± 0.766、2.324±1.208),有显著差异(P<0.05);HAP 组PLR明显高于NP组(129.4±33.28 vs 104.4±33.41),有显著差异(P<0.05);HA组LMR分别高于NP组和HAP组(6.757±1.020 vs 3.780±1.262、4.807 ±1.485),HAP组LMR高于NP组,均有显著差异(P<0.05)。 4.HAP 组血清 miRNA-133a 低于NP组(0.958±0.157 vs 1.526±0.591),有显著差异(P<0.05);HA组血清miRNA-135a明显低于NP组(0.909±0.435 vs 1.927±0.411),有显著差异(P<0.05)。 结论: 1.习惯性流产患者外周血单核细胞 B7-H3 高表达且存在Th1/Th2失衡偏向Th1,提示B7-H3可能介导单核细胞的迁移和活化,继而与T细胞表面相应受体结合,参与了习惯性流产的发病机制。 2.习惯性流产患者中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)低表达,可能与该类患者中性粒细胞分泌大量炎症介质诱导细胞异常增殖并聚集炎症细胞,进而推进病程的发展有关。 3.习惯性流产患者血清miRNA-135a低表达,可能参与了习惯性流产的发生。