幽门螺杆菌(Helicobacter pylori，H.pylori)是一种螺旋状微需氧的革兰氏阴性杆菌，定植于人胃粘膜，1983年澳大利亚学者Warren和Marshall在人胃粘膜活检组织中首次分离到该菌。H.pylori的感染是引起慢性胃炎和消化性溃疡的主要病因，与胃腺癌及粘膜相关性淋巴组织淋巴瘤的发生也密切相关，1994年被WHO定为Ⅰ类致癌原。全球有超过50％的人群感染H.pylori，在经济落后国家H.pylori的感染率可高达80—90％。大部分感染者(80％)为无症状的带菌者，但10—20％的感染者可发生慢性胃炎和消化性溃疡，更少数的患者(0.1—4％)则可发展为胃癌，因此H.pylori致病机制的研究及其感染的合理治疗和预防已越来越受到全球的关注。 第一部分 babA2基因在幽门螺杆菌临床菌株中的分布 人类感染H.pylori后出现不同的临床结果，取决于细菌、宿主和环境三者共同的影响，其中细菌毒力因子在疾病发生发展过程中起重要作用。部分细菌毒力因子，如细胞毒素相关基因A蛋白(cytotoxin-associated gene A，CagA)、空泡毒素(vacuolating cytotoxin A，VacA)和血型抗原结合粘附素(blood-group antigen-binding adhesin，BabA)等被认为与临床疾病的严重程度有关。BabA是 抓户人？。。。。。。缓迄今为止研究最为明确的H．pylon粘附素之一，它能够与胃上皮细胞表面岩藻糖基化的Lewis b血型抗原结合而介导H，pylon与胃上皮细胞的粘附。BabA由babAZ基因编码，1999．年德国研究者发现babAZ基因与十h指肠溃疡和胃癌的发生有密切关系，而且有研究表明babAZ基因与H．pylon cagA基因存在一定的相关性，目前babAZ基因在H．pylon致病机制中的作用已引起学者的普遍关注。 本课题检测了浙江省 119株 H，pylon临床菌株的 babAZ和 cagA基因，以 明确该地区H．pylon临床菌株中 babAZ和 cagA基因的分布，并分析了 babAZ 基因和 cagA基因的关系及 babAZ基因与慢性残表性胃炎、慢性萎缩性胃炎、 消化性溃疡和胃癌的关系。 1 材料和方法 1．l研究对象 200年一 2002年对浙江大学医学院附属第二医院和浙江省舟 山市岱山县人民医院提供的患者胃窦粘膜标本进行H，pylon分离培养，以培养 阳性的 119例患者作为研究对象，其中男性 75例，女性 44例，年龄 20—75岁， 平均年龄43岁，经病理检查证实为慢性浅表性胃炎49例，慢性萎缩性胃炎33 例，消化性溃疡3I例，胃癌6例。 1．2 H．PylOOI菌株 将患者胃窦粘膜组织研磨后涂布在ECY选择性培养基上， 37℃微需氧OOCOZ，10OO。，85ON2）。100％湿度条件下培养S天，培养物经菌落 特征，革兰氏染色镜检菌体形态，快速尿素酶试验和氧化酶试验鉴定。 l．3 PCR扩增和 PCR产物检测 1．3．1引物设计参照文献报道设计b劝AZ和cagA基因片段扩增引物。 1．3．2 H。pylon基因组DNA提取用标准酚：氯仿异成醇法提取H．py．；ori 基因组DNA。 1．3．3 PCR反应条件PCR反应体系50HI；反应参数根据不同的引物作相应 2 川广人穿配。。。。级调整。1．3．4 PCR产物检测取PCR扩增产物和相对分子量标准参照物各sul加入二．5％琼脂糖凝胶中，100V电压电泳30min，取凝胶置于紫外光下观察结果。1．4 统计学处理实验结果采用 X“检验，WO．05认为具有统计学差异。2 结 果 在 119株 H pyl。l．临床菌株中 babAZ和 cagA基因的阳性率分别为 84．0 ％和96．6％巾abAZ基因和cagA基因的分布无关（NO．05）；不同疾病中H Prjorj babAZ基因阳性率的差异无显著性（NO．05）。 3 讨 论 H Pyjor在胃粘膜上的粘附是其致病的首要步骤。细菌动力、尿素酶活性 和菌体表面的粘附素是H pyjon在胃粘膜上粘附定居的决定因素。迄今为止 己经发现了多种H Pion粘附素，包括BabA、N一乙酸神经氨酸乳糖结合原纤 维血凝素乙iP毗）、中性粒细胞激活蛋白（neutroPhil－activating p。ot。。n，NAP） 等。BabA不仅参与H pylon与胃上皮的粘附，而且在H pylon所致胃粘膜 的免疫炎症反应中发挥重要作用。Gerhard等的研究表明babAZ基因与消化性溃 疡及胃癌等严重H 厂厂ion相关消化道疾病的发生有密切关系。本课题对119 株 H nylorj临床菌株的 babAZ基因分析后发现 babAZ基因的阳性率高于西方 国家的报道，babAZ基因与cagA基因的分布无关。在慢性浅表性胃炎、慢性萎 缩性胃炎、消化性溃疡及胃癌中babAZ基因的阳性率有增高的趋势，但无统计 学差异，说明在本研究中H PJ，IOfi bfbAZ基因与H Py1OI’j所致胃十二指肠 疾病的类型无关。babAZ基因阴性的 H Piori可能通过其他粘附素在胃粘膜上 粘附定居。 3 吓if人寒时，。。。⑤4 结 论 浙江地区 H Prlorj临床菌株以 babAZ和 casA基因阳性的菌株为主，babAZ基因和 cagA基因