肝纤维化是机体对各种病因引起的慢性肝损伤后的一种损伤修复反应,表现为肝内结缔组织增生与沉积。肝纤维化可逐步演变为肝硬化,甚至肝癌。本论文主要探讨早期生长反应因子（early growth response 1,Egr1）在肝纤维化发生、发展中的重要作用,以及连翘酯苷A（Forsythiaside A,FTA）改善肝纤维化的机制。本研究运用了四氯化碳（carbon tetrachloride,CCl4）、对乙酰氨基酚（N-acetyl-p-aminophenol,acetaminophen,APAP）和黄毒素B（Diosbulbin B,DB）三种肝毒性物质、胆管结扎（bile duct ligation,BDL）（胆汁淤积症）和蛋氨酸胆碱缺乏饲料饮食（Methionine-Choline-Deficent Diet,MCD）（非酒精性脂肪性肝炎,nonalcoholic steatohepatitis,NASH）五种诱导小鼠肝纤维化的实验模型。发现上述五种肝纤维化模型中小鼠肝组织中Egr1的核转位均显著增加。接下去运用了Egr1基因敲除（Egr1 knockout,Egr1 KO）小鼠,发现在DB,BDL或MCD造模后,Egr1基因敲除小鼠相比野生型小鼠的肝纤维化程度更加严重。在上述五种肝纤维化模型中,小鼠血清中高迁移率族蛋白B1（high mobility group box 1 protein,HMGB1）的含量也显著升高。而Egr1基因敲除会进一步提升DB,BDL或MCD诱导肝纤维化小鼠血清中HMGB1含量的上升,提示Egr1可能负向调控肝纤维化中HMGB1的释放入血。最新研究发现肝星状细胞（hepatic stellate cell,HSC）并不是细胞外基质（Extracellular Matrix,ECM）产生的唯一来源。接下去的实验结果发现,从上述五种实验性肝纤维化模型动物中分离纯化的肝脏血管部分,包括α-平滑肌动蛋白（alpha-smooth muscle actin,α-SMA）、波形蛋白（vimentin,vim）和结蛋白（desmin）在内的ECM蛋白的表达都显著增加。同时,相对于正常野生小鼠,Egr1基因敲除会进一步提升DB,BDL或MCD造模小鼠肝脏血管纯化部分中ECM蛋白的表达。进一步研究发现,当HMGB1与人肝窦内皮细胞（liver sinusoidal endothelial cell,LSEC）或人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cell,HUVEC）共同孵育12 h或24 h,LSEC和HUVEC中包括α-SMA,vim和desmin在内的ECM蛋白的表达都明显增加。但是,当人肝星状细胞LX2与相同浓度的HMGB1共同孵育6 h或12 h,ECM蛋白的表达并没有发生明显变化。进一步研究发现,无HMGB1刺激的LSEC可以减少HSC的激活,而给予HMGB1刺激的LSEC则失去对HSC激活的抑制作用。水飞蓟素（silymarin,SIL）在临床上常被用于肝纤维化的治疗。研究结果显示SIL通过提升肝脏中Egr1核转位,抑制HMGB1释放入血清,减少肝脏血管纯化部分中ECM蛋白的产生,从而有助于缓解CCl4诱导的小鼠肝纤维化。相关结果进一步证实Egr1调控HMGB1介导的肝脏血管ECM生成在肝纤维化发生、发展中的重要作用。连翘酯苷A（Forsythiaside A,FTA）是清热解毒中药连翘（Forsythiae Fructus）中的主要活性成分。研究结果显示,连翘水提物（the water extract of Forsythiae Fructus,FSE）和FTA都能明显降低由CCl4诱导的小鼠肝脏羟脯氨酸（hydroxyproline,HYP）含量的升高,减少肝脏的胶原纤维沉积,抑制CCl4诱导的肝脏中HSC激活,说明FSE和FTA都具有良好的抗肝纤维化作用。进一步研究发现,FTA能够提升由于CCl4造模导致的Egr1核转位激活,减少血清中升高的HMGB1水平,降低小鼠肝脏血管纯化部分中升高的ECM蛋白表达。简而言之,本研究显示Egr1在肝纤维化的发生、发展中具有重要调控作用,其机制可能是通过负向调控HMGB1释放入血清,进而抑制其诱导的肝脏血管内皮细胞产生ECM蛋白,缓解肝纤维化的发生、发展;同时上述机制在SIL发挥改善肝纤维化的作用中也作出了一定的贡献。本论文研究还发现了连翘及其主要活性成分连翘酯苷A的抗肝纤维化作用;连翘酯苷A也可以通过调控Egr1介导的HMGB1释放,抑制肝脏血管ECM的产生,缓解肝纤维化的发生、发展。通过论文研究为临床上肝纤维化治疗提供了新的策略和思路,也为连翘酯苷A作为抗肝纤维化药物的进一步研发奠定了基础。