【摘 要】
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以‘早黑宝’葡萄新梢叶片为试材,采用病毒诱导基因沉默（virus-induced gene silencing,VIGS）技术,分别沉默VvANR、VvLAR2、VvMYBPA1、VvMYBPA2及VvMYBPA1和VvMYBPA2,并于沉默后进行SA孵育,探究外源水杨酸（salicylic acid,SA）诱导葡萄叶片黄烷-3-醇积累规律及其机制。结果表明:（1）0.5 mmol·L-1外源SA
【基金项目】
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山西省应用基础研究计划（面上自然基金）,外源SA诱导VvMYBPA1/PA2调控葡萄叶片黄烷-3-醇积累分子机制研究（项目编号:201901D111222）； 山西省第五批新兴产业领军人才资助计划,富多酚葡萄生产技术研发； 山西省重点研发计划项目,水杨酸介导葡萄果实多酚积累关键技术研发与示范（项目编号:201803D211016-
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以‘早黑宝’葡萄新梢叶片为试材,采用病毒诱导基因沉默（virus-induced gene silencing,VIGS）技术,分别沉默VvANR、VvLAR2、VvMYBPA1、VvMYBPA2及VvMYBPA1和VvMYBPA2,并于沉默后进行SA孵育,探究外源水杨酸（salicylic acid,SA）诱导葡萄叶片黄烷-3-醇积累规律及其机制。结果表明:（1）0.5 mmol·L-1外源SA促进‘早黑宝’葡萄叶片游离SA、总酚、总类黄酮、总黄烷-3-醇及黄烷-3-醇单体积累,诱导ANR、LAR酶活性增强,促进黄烷-3-醇生物合成相关基因VvANR、VvLAR1、VvLAR2、VvMYBPA1和VvMYBPA2转录。（2）VvANR、VvLAR2沉默后,葡萄叶片中VvANR、VvLAR2表达量极显著降低,ANR酶活性降低;沉默后SA孵育促进叶片中黄烷-3-醇积累;ANR、LAR酶活性在10min时极显著升高;VvANR、VvLAR2表达在孵育后10 min极显著升高。外源SA能够促进VvANR、VvLAR2沉默的葡萄叶片中ANR、LAR酶活性提高或激活VvANR、VvLAR2基因表达,从而诱导黄烷-3-醇单体积累。（3）VvMYBPA1、VvMYBPA2沉默后,葡萄叶片中VvMYBPA1、VvMYBPA2表达量极显著降低,ANR、LAR酶活性及黄烷-3-醇单体含量降低;沉默后SA孵育促进叶片中黄烷-3-醇积累;ANR、LAR酶活性升高;VvMYBPA1表达量极显著上调,VvMYBPA2表达量虽上调但差异不显著。外源SA促进VvMYBPA1、VvMYBPA2沉默的ANR和LAR酶活性升高从而促进葡萄叶片黄烷-3-醇单体积累;SA促进VvMYBPA1、VvMYBPA2沉默的VvMYBPA1、VvMYBPA2基因表达从而促进黄烷-3-醇物质积累。（4）VvMYBPA1和VvMYBPA2共沉默后,葡萄叶片中VvMYBPA1、VvMYBPA2表达量、ANR和LAR酶活性及黄烷-3-醇单体含量均极显著降低;沉默后SA孵育促进叶片中黄烷-3-醇积累;ANR、LAR酶活性显著升高;VvMYBPA1表达量在10～30 min极显著上调,VvMYBPA2表达量在10 min极显著上调。外源SA促进VvMYBPA1和VvMYBPA2共沉默的ANR和LAR酶活性从而促进葡萄叶片黄烷-3-醇单体合成;SA促进VvMYBPA1和VvMYBPA2沉默的VvMYBPA1或VvMYBPA2或两者都表达进而促进黄烷-3-醇单体物质积累;且SA对VvMYBPA1和VvMYBPA2沉默下的VvMYBPA1表达的促进作用强于VvMYBPA2。
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