西番莲在栽培过程中极容易感染植物病毒。在感染西番莲的病毒中,Potyvirus属的夜来香花叶病毒（Telosma mosaic virus,Tel MV）和东亚西番莲病毒（East Asian passiflora virus,EAPV）是危害西番莲最重要的两种病毒,严重威胁我国西番莲产业的健康发展。最近新发现的西番莲重型斑驳相关病毒（Passionflower severe mottle-associated virus,PFSMa V）也属于Potyvirus属。快速简单、高效灵敏的实用病毒检测技术是生产无毒种子、种苗和科学防控作物病毒病的关键。为此,本论文制备了分别抗Tel MV及EAPV的特异性单克隆抗体、抗Tel MV、EAPV和PFSMa V的广谱单克隆抗体,基于制备的抗体,创建了检测Tel MV、EAPV和PFSMa V的血清学方法,从而为这3种侵染我国西番莲Potyviruses的检测诊断、无病毒西番莲种苗生产及三种病毒病的科学防控提供检测技术和试剂。（1）抗Tel MV特异性单克隆抗体制备及其血清学方法:以原核表达的Tel MV CP重组蛋白为免疫原,经杂交瘤技术获得了4株抗Tel MV的特异性鼠源单克隆抗体,即3G7、20H11、10B11和3E10。经Western blot分析证明,Tel MV CP蛋白能被4株单克隆抗体特异性地杂交。以3G7、20H11、10B11或3E10为检测一抗建立了检测Tel MV的抗原包被酶联免疫吸附试验（ACP-ELISA）、组织印迹酶联免疫吸附试验（Tissue print-ELISA）和斑点酶联免疫吸附试验（dot-ELISA）。上述方法中,ACP-ELISA检测病叶研磨液灵敏度稀释倍数高达1:81,920倍（重量/体积,g/m L）,dot-ELISA检测病叶稀释倍数达到1:7,680,并且三种方法检测同属的EAPV、PFSMa V、马铃薯Y病毒、李痘病毒、芜菁花叶病毒以及健康的西番莲植物不发生交叉反应。将血清学方法应用于田间检测时,三种方法与RT-PCR检测结果相符,表明三种血清学方法可以准确有效地检测西番莲中的Tel MV。（2）抗EAPV特异性单克隆抗体制备及其血清学方法:以原核表达的EAPV CP重组蛋白作为免疫原,利用杂交瘤细胞技术获得了4株抗EAPV的特异性单克隆抗体,即11E7、14H3、24F1、4H3。经Western blot结果证实,EAPV CP蛋白都能够被4株单克隆抗体特异性地识别。以11E7、14H3、24F1、4H3为检测抗体建立了检测EAPV的dot-ELISA、ACP-ELISA和Tissue print-ELISA。检测病叶时,在dot-ELISA方法中叶片研磨液可稀释至1:1,920倍,在ACP-ELISA方法中叶片研磨液可稀释至1:20,480倍,并且三种血清学方法检测同属的Tel MV、PFSMa V、马铃薯Y病毒、李痘病毒和芜菁花叶病毒以及健康西番莲植物组织没有交叉反应。田间样本检测结果发现,建立的三种血清学方法可以准确有效地检测西番莲中的EAPV。（3）抗Tel MV、EAPV和PFSMa V广谱单克隆抗体制备及其血清学方法:用Tel MV、EAPV和PFSMa V三种病毒复合侵染的田间西番莲病叶提纯病毒粒子,以提纯的混合病毒粒子为免疫原,通过杂交瘤细胞技术获得了4株（17E4、6D8、6D12和11A12）能特异性检测上述三种侵染西番莲的Potyviruses的广谱单克隆抗体。Western blot实验证实,创制的4株单克隆抗体能同时识别Tel MV、EAPV和PFSMa V的CP蛋白。基于17E4、6D8、6D12和11A12的特性,建立筛查上述3种侵染西番莲的Potyviruses的ACP-ELISA、Tissue print-ELISA和dot-ELISA方法。建立的检测方法均能广谱、特异、灵敏地检测西番莲植物中Tel MV、EAPV和PFSMa V的侵染,而检测感染马铃薯Y病毒、李痘病毒、马铃薯A病毒、芜菁花叶病毒、黄瓜花叶病毒和西番莲潜隐病毒的病叶及非感染的西番莲叶片呈阴性反应。在检测病叶研磨液的稀释样品时,dot-ELISA和ACP-ELISA实验中病叶的最大稀释倍数（灵敏度）可高达1:20480和1:327,680倍（重量/体积,g/m L）。田间样品的检测结果表明建立的血清学方法能灵敏特异、广谱高效地检测3种侵染我国西番莲的potyviruses。