冻干鼻喷流感减毒活疫苗采用鼻喷途径免疫,能激发人机体的细胞免疫、体液免疫和粘膜免疫,具有减免注射疼痛,免疫保护作用持久,有一定作用交叉保护作用等优点,特别适合儿童接种免疫。本文我们将介绍流感病毒生产工艺优化,提高毒种病毒滴度,从而提高疫苗产量,降低生产成本。创造更大经济效益。本研究采用SPF鸡胚作为流感病毒生产基质,经过毒种制备,探索WHO世界卫生组织推荐的2019-2020年北半球流感毒株组H1N1（A/17/Brisbane/2018/8175（H1N1）pdm09）型流感病毒、H3N2（A/17/Brisbane/2018/3610（H3N2））型流感病毒以及B（B/Colorado/06/2017-CDC-LV17B）型流感病毒的工艺研究。主要研究结果如下:1、以病毒滴度为参考指标,确定了H1N1型别毒种最适宜制备工艺参数为:稀释度10^-5、培养温度32.5℃、培养湿度75%、培养时间52h、冷胚时长20h。2、以病毒滴度为参考指标,确定了H3N2型别毒种最适宜制备工艺参数为:稀释度10^-6、培养温度33.0℃、培养湿度75%、培养时间60h、冷胚时长16h。3、以病毒滴度为参考指标,确定了B型别毒种最适宜制备工艺参数为:稀释度10^-6、培养温度31.5℃、培养湿度65%、培养时间68h、冷胚时长16h。4、经过质量检查合格,建立了3种型别流感病毒种子库,供商业化生产冻干鼻喷流感减毒活疫苗生产使用。本研究确立了毒种生产工艺参数,为冻干鼻喷流感减毒活疫苗的生产提供参考,应用于生产中单枚鸡胚生产疫苗由原来的3.5支提高到10.3支,大大节约成本,提高产量,为企业创造更大经济价值。