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抗缪勒氏管激素(Anti-mulerian hormone,AMH)是β转化生长因子超家族的成员之一,AMH可以抑制原始卵泡的募集和降低卵泡对FSH的敏感性,但是作用机制尚不清楚。近些年来,AMH作为女性卵巢储备功能的指示指标得到大量的研究,尤其是AMH在女性卵巢疾病上的应用研究。同时,AMH还可以作为反刍动物超数排卵的预测指标,在反刍动物育种中起到了良好的作用。但是,猪作为理想的医学实验模型动物,AMH的研究还很少。本研究通过对母猪血清AMH浓度和AMH基因的相关研究,为AMH应用于母猪的生产管理方面提供一定的理论依据和科学参考。实验一:母猪血清AMH浓度的测定本实验采集了浙江省海宁实验场共401头母猪的血液样本,采用猪抗缪勒氏管激素酶联免疫分析方法对血清AMH浓度进行了检测,结果显示正常母猪的血清AMH浓度在2.8ng/mL-5.0ng/mL,不孕母猪和患有卵巢疾病的母猪血清AMH值分别为5.561ng/mL和6.506ng/mL,高于正常产仔母猪。研究结果表明:测定母猪血清中AMH浓度,可间接作为判断母猪卵巢功能和是否患有卵巢疾病的早期重要参考指标。实验二:母猪AMH基因的突变检测本实验采集了海宁实验场370头母猪的耳组织样,通过提取DNA,PCR扩增AMH基因片段,采用PCR产物直接测序,然后通过Chromas软件比对发现,AMH基因外显子区域400bp处有插入1个单碱基C,经DNAMAN软件预测氨基酸序列后发现,此插入改变了 AMH基因的蛋白质。针对这一插入突变位点,采用PCR产物直接测序在370头母猪群体内分型,其中检测到17头有插入突变,进一步与母猪的产仔数、断奶活仔猪数性状进行相关分析,结果表明携带有插入突变的母猪产仔数显著高于未携带插入突变的母猪(P<0.05)。实验三:母猪AMH基因的组织表达分析本实验采用实时荧光定量PCR方法检测了 3头7月龄金华母猪的心、肝、脾、肺、肾、胃、腹肌、腹部脂肪、子宫和卵巢组织的AMH基因mRNA表达情况,结果表明AMH基因在卵巢中的表达量最高,其次在肺组织中有较低表达,在其他组织未检测到表达。