【目的】第一部分：研究鱼藤素（deguelin）在体内和体外对头颈部鳞状细胞癌（HNSCC）细胞凋亡的影响。第二部分：探讨热休克蛋白90（Hsp90）在鱼藤素诱导的HNSCC细胞凋亡中所涉及的信号转导通路及其作用机制。第三部分：分析腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）在鱼藤素诱导HNSCC细胞凋亡和自噬中关键因子及其作用机制。【方法】第一部分：选取人喉癌Hep-2细胞、人表皮鳞癌A-253细胞，人舌鳞状细胞癌SCC-9细胞，分别进行细胞培养，采用免疫学、分子生物学等实验技术，进行MTT、免疫荧光、免疫酶标、Western blot实验等检测细胞凋亡，根据处理的不同药物浓度和时间梯度，分析鱼藤素在体外对细胞死亡和凋亡的影响。在此基础上，将鱼藤素和5-FU联合应用，观察其对Hep-2细胞凋亡的影响。建立裸鼠Hep-2异种移植模型，成瘤后给予灌胃鱼藤素处理，用药期间测量鼠重、肿瘤长径和短径，计算肿瘤体积。观察灌胃一定剂量的鱼藤素对小鼠肿瘤的影响。第二部分：以HNSCC细胞中Akt、Survivin以及Cdk4的表达为重点研究对象，用Western blot实验、IP实验等方法，探讨Hsp90在鱼藤素诱导的Hep-2细胞、A-253细胞、SCC-9细胞等HNSCC细胞凋亡中的调控作用机制。第三部分：以AMPK为重点研究对象，以Western blot实验、IP实验、siRNA实验等方法，探讨AMPK在鱼藤素诱导HNSCC细胞凋亡和自噬中的作用机制。【结果】第一部分：鱼藤素可不同程度地促进Hep-2细胞、A-253细胞、SCC-9细胞的凋亡，并且此促凋亡作用是时间浓度依赖性的；鱼藤素通过上调Hep-2细胞caspase-3的活性，同时下调Bcl-xL的表达而促进细胞凋亡；低剂量鱼藤素明显增强5-FU诱导的Hep-2细胞的凋亡；灌胃鱼藤素可缩小Hep-2细胞异种移植裸鼠肿瘤的体积，并提高其存活率。第二部分：鱼藤素抑制Hep-2细胞的Akt信号通路；Hep-2细胞中，鱼藤素阻断Akt与Hsp90相结合，同时促进Akt与泛素相结合，从而促进细胞凋亡；MG-132可逆转鱼藤素诱导的Hep-2细胞Akt以及Hsp90的下调；鱼藤素抑制Hep-2细胞中Survivin和Cdk4的表达；Hep-2细胞中，鱼藤素阻碍Hsp90与Survivin和Cdk4之间的关联，而又促进泛素与Survivin和Cdk4之间的关联；MG-132可逆转鱼藤素诱导的Hep-2细胞Akt的降解；在A-253细胞和SCC-9细胞中，鱼藤素对Akt、Cdk4和Survivin的表达具有相似的抑制作用。第三部分：伏马毒素B1抑制鱼藤素诱导的Hep-2细胞中神经酰胺的合成；Hep-2细胞中，联用C6神经酰胺加强鱼藤素诱导的细胞死亡，而联用伏马毒素B1减少鱼藤素诱导的细胞死亡；鱼藤素激活Hep-2细胞中LKB1、AMPK、ACC的磷酸化；AMPKɑ1RNAi抑制鱼藤素诱导的Hep-2细胞AMPK的磷酸化；AMPK的激活促进鱼藤素诱导的Hep-2细胞的死亡；C6神经酰胺增强鱼藤素诱导的Hep-2细胞AMPK的磷酸化；Z-VADfmk和3-MA均能够减少鱼藤素诱导的Hep-2细胞的死亡；鱼藤素诱导Hep-2细胞Ulk的磷酸化以及LC3B的表达；鱼藤素促进Hep-2细胞中Ulk和AMPK之间的相互结合；AMPKɑ1RNAi抑制鱼藤素诱导的Hep-2细胞Ulk的磷酸化以及LC3B的表达。【结论】第一部分：鱼藤素能够诱导HNSCC细胞凋亡，其机制可能为增加caspase-3的活性，同时下调Bcl-xL的表达，最终诱导细胞的凋亡；低剂量的鱼藤素即能增强人喉鳞癌细胞株Hep-2细胞对5-FU的敏感性。鱼藤素在人喉鳞癌细胞株Hep-2异种移植模型上有显著的抗肿瘤生长和提高生存率的作用。第二部分：在HNSCC中，鱼藤素通过阻断Hsp90与Akt相互结合，并促进泛素与Akt相结合，从而诱导Akt的降解，影响细胞凋亡。HNSCC细胞中，鱼藤素通过阻断Hsp90与Survivin和Cdk4之间的蛋白结合，同时又促进泛素与Survivin、Cdk4之间相互结合，从而诱导Survivin和Cdk4的降解，影响细胞凋亡。第三部分：鱼藤素诱导人喉鳞癌细胞株Hep-2细胞中神经酰胺的合成增加，从而进一步激活LKB1-AMPK-ACC的磷酸化，最终增加鱼藤素诱导的Hep-2细胞凋亡。鱼藤素诱导Hep-2细胞AMPK的磷酸化，并进一步激活AMPK/Ulk1依赖的自噬途径，上调LC3B的表达，最终增加鱼藤素诱导的Hep-2细胞自噬。