miRNA-141通过PI3K/Akt通路调控滋养细胞凋亡参与子痫前期发病机制的研究

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研究目的通过调节体外培养滋养系Bewo细胞中miRNA-141的表达,研究其对滋养细胞凋亡的影响,探讨miRNA-141在子痫前期中可能的发病机制。实验内容1.分别使用miR-141过表达质粒、沉默质粒及阴性对照质粒转染滋养细胞系Bewo细胞,转染48h后的细胞通过流式细胞术检测凋亡率,验证miR-141对滋养细胞凋亡的影响。2.质粒分组转染后的滋养细胞系Bewo细胞,通过Western blot检测细胞内PI3K及Akt蛋白的表达水平,并使用Image J软件对各组条带进行灰度值测量分析,观察miR-141对Bewo细胞PI3K和Akt表达的影响。实验结果1.miR-141过表达质粒转染组Bewo细胞凋亡率相比于阴性对照组(P=0.021)及空白对照组(P=0.032)均减少;阴性对照组及空白对照组细胞凋亡率无显著差异(P=0.444)。2.miR-141沉默质粒转染组Bewo细胞凋亡率高于阴性对照组(P=0.0099)及空白对照组(P=0.059);阴性对照组及空白对照组细胞凋亡率无显著差异(P=0.444)。3.miR-141过表达质粒转染组PI3K蛋白的表达量高于阴性对照组(P<0.001)及空白对照组(P<0.001),沉默质粒转染组PI3K蛋白水平低于空白组(P<0.001)及阴性对照组(P<0.001),空白对照组及阴性对照组PI3K表达量无显著差异(P=0.1975)。4.miR-141过表达组Akt蛋白的表达量高于阴性对照组(P<0.001)及空白对照组(P<0.001),沉默组Akt蛋白水平低于空白组(P<0.001)及阴性对照组(P=0.0012),空白对照组及阴性对照组表达量无明显差异(P=0.0596)。实验结论miRNA-141可以通过细胞内PI3K/Akt通路调控滋养细胞的凋亡参与子痫前期的发病。
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