目的 糖尿病是由于体内胰岛素相对或绝对不足造成的一种常见的内分泌代谢疾病。目前糖尿病已成为继心脑血管疾病和肿瘤之后第三位严重危害人类健康的疾病。目前的治疗手段主要为各种方法的补充胰岛素,过量胰岛素应用还可导致严重低血糖。胰腺或胰岛移植以替代功能丧失的胰岛,虽然取得了一定的疗效,但由于受供体来源不足、免疫排斥、长期免疫抑制治疗的影响,不能重建正常的血糖调控而导致的各种严重的并发症,使其临床应用受到限制。近年来,随着基因重组技术及转基因技术迅速发展,再造分泌胰岛素的克隆细胞系或特异性阻断针对胰岛自身免疫过程来替代目前的胰岛素注射治疗和胰岛素移植治疗。糖尿病基因治疗在近20年来有了较大进步,取得大量宝贵的资料,但目前尚处于动物实验阶段,仍存在的两大关键问题急待解决:①胰岛素基因的调控问题。②基因的转染手段是基因治疗的关键,目前的转染手段在安全性和效率上都有待提高。 利用转基因方法建立人类疾病动物模型和用其他方法相比具有许多优点。诸如遗传背景清楚,遗传物质改变简单,建立的模型更自然和更接近病人症状;建立过程操作简便,周期短,而且建立的转基因动物模型不需要特殊的饲养条件即可保持疾病症状,按照孟德尔规律代代相传,因此建立人胰岛素转基因鼠动物模型是进行糖尿病基因治疗的首选动物模型。上一世纪八十年代即有若干实验室建立人胰岛素基因表达的转基因鼠系,但是由于人胰岛素基因在动物体内持续的高表达,胰岛素分泌水平过高导致鼠体低血糖甚至引起动物的死亡,不能根据血糖浓度调控胰岛素基因治疗中的表达产物,导致糖尿病基因治疗的停滞不前。 四环素(tetracycline,tet)诱导表达系统是1992年Gossen等建立的比较先进的调控系统,1995年又对其进行改造,形成Tet-off/Tet-on基因诱导表达调控系统。它能有效的对真核细胞及转基因动物的外源基因进行表