单核细胞极化在慢性乙型肝炎中的临床研究

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目的:通过检测慢性乙型肝炎患者外周血中经典途径活化的单核巨噬细胞(M1型细胞)和替代途径活化的单核巨噬细胞(M2型细胞)亚型的数量与功能变化,观察慢性乙肝病毒感染是否能够引起M2型单核细胞处于优势状态,并下调机体的免疫应答,探讨单核细胞极化在慢性乙型肝炎发生发展过程中的临床意义,为慢性肝炎的免疫学预防及治疗提供实验依据。方法:随机选择51例慢性乙型肝炎患者,其中慢性乙型肝炎轻度10例,中度10例,重度31例,以及正常对照组13例,收集临床资料及实验室检查结果。采用流式细胞术(FCM)检测机体外周血单核细胞表型,以CD80、CD86、HLA-DR的表达水平代表M1型单核细胞的表型特征,以CD163的表达水平代表M2型单核细胞的表型特征:用抗凝管分别抽取5ml外周静脉血,采用percoll分层液分离出单个核细胞(PBMCs),进行细胞计数后按照设置的抗体染色方案分管,以CD14圈定单核细胞,检测慢性乙型肝炎患者及正常对照组外周血单核细胞表面分子CD80、CD86、HLA-DR、CD163的表达。计量资料的结果以均数加减标准差(x±s)来表示,并采用q检验进行统计学分析。结果:(1)正常对照组、慢性乙型肝炎轻度组、中度组、重度组外周血单核细胞CD80的表达水平分别为:(66.32±5.58)%、(57.29±4.32)%、(50.75±5.01)%、(42.32±5.19)%,任意两组间的差异均具有统计学意义(P<0.01);上述四组样本中外周血单核细胞CD86的表达水平分别为:(19.92±1.72)%、(13.12±1.63)%、(5.64士1.72)%、(4.06±1.37)%,任意两组间的差异均具有统计学意义(P<0.01);上述四组样本中外周血单核细胞HLA-DR的表达水平分别为:(63.68±7.43)%、(53.55±4.87)%、(38.82±4.14)%、(34.68±5.57)%,除慢性乙型肝炎中度组与重度组间HLA-DR的表达水平差异无统计学意义(P>0.05)外,其余各组间差异两两比较均有统计学意义(P<0.01);上述四组样本外周血单核细胞CD163的表达水平分别为:(14.82±3.04)%、(19.83±3.50)%、(33.10±5.26)%、(49.01±4.95)%,任意两组间的差异均具有统计学意义(P<0.05)。(2)51例慢性乙型肝炎患者中,CD80与谷丙转氨酶(ALT)、总胆红素(TBIL)的相关系数分别为-0.771、-0.737(P<0.001),CD86与ALT、TBIL的相关系数分别为-0.865、-0.677(P<0.001),HLA-DR与ALT、TBIL的相关系数分别为-0.751、-0.757(P<0.001),CD163与ALT、TBIL的相关系数分别为0.844、0.846(P<0.001);正常对照组CD80、CD86、HLA-DR、CD163与ALT、TBIL的相关系数均为0。结论:慢性乙型肝炎患者外周血单核细胞CD80、CD86、HLA-DR的表达明显低于正常对照组,而CD163的表达明显高于正常对照组,慢性乙型肝炎患者外周血单核细胞存在M1型单核细胞和M2型单核细胞平衡失调,平衡向M2型单核细胞方向漂移。且慢性乙型肝炎患者CD80、CD86、HLA-DR的表达水平与ALT、TBIL呈负相关,CD163的表达水平与ALT、TBIL呈正相关,即随着肝脏损害程度的加重,CD80、CD86、HLA-DR的表达逐渐下降,CD163的表达逐渐增高,其与肝炎在宿主体内发生发展密切相关,通过纠正这些免疫失调,将为慢性肝炎的预防与治疗提供有效策略。而正常对照组外周血单核细胞CD80、CD86、HLA-DR、CD163与ALT、TBIL零相关。
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