【摘 要】
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目的:三叶青藤正丁醇部位（nbuIR）对CIA小鼠Th17/Treg免疫平衡的调节作用及机制研究。方法:体内实验中,选用DBA/1小鼠建立胶原诱导的关节炎（CIA）动物模型。将造模成功的小鼠随机分为CIA对照组、甲氨蝶呤组（MTX）、nbuIR低、中、高剂量组（nbuIR-L、nbuIR-M、nbuIR-H）,另设空白对照组（Blank）,分别予以灌胃给药。干预结束后,使用酶联免疫吸附测定法（EL
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目的:三叶青藤正丁醇部位（nbuIR）对CIA小鼠Th17/Treg免疫平衡的调节作用及机制研究。方法:体内实验中,选用DBA/1小鼠建立胶原诱导的关节炎（CIA）动物模型。将造模成功的小鼠随机分为CIA对照组、甲氨蝶呤组（MTX）、nbuIR低、中、高剂量组（nbuIR-L、nbuIR-M、nbuIR-H）,另设空白对照组（Blank）,分别予以灌胃给药。干预结束后,使用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中IL-1β,IL-6,TNF-α,PGE2各因子表达水平;流式细胞术检测各组Th17、Treg细胞水平;QPCR检测各组脾脏淋巴细胞中IL-17A、Foxp3、RORγt、IL-23R、JAK2、STAT3 m RNA相对表达量。体外实验中,分离出小鼠脾脏淋巴细胞,加入细胞因子诱导及药物干预,分设为空白组（Blank）、模型组（Model）、甲氨蝶呤组（MTX）、三叶青藤正丁醇部位药物低浓度组（nbuIR-L）、药物中浓度组（nbuIR-M）、药物高浓度组（nbuIR-H）,细胞培养60 h后流式检测各组Th17细胞水平;QPCR检测小鼠脾脏淋巴细胞中IL-17A、RORγt、IL-23R、JAK2、STAT3m RNA相对表达量。结果:1、体内实验中,MTX、nbuIR-L、nbuIR-M、nbuIR-H各组与CIA对照组相比,血清TNF-α、PGE2的水平显著降低（P＜0.01）;而在血清IL-6、IL-1β的表达水平上,nbuIR-L与CIA组相比有所降低,具有统计学差异（P＜0.05）。CIA小鼠脾淋巴细胞中Th17细胞比率水平显著升高（P＜0.01）,而MTX、nbuIR-M、nbuIR-H组的Th17细胞比率明显低于CIA组（P＜0.01）。Treg细胞实验结果则相反,MTX、nbuIR-L、nbuIR-M、nbuIR-H各组与CIA组相比,Treg细胞含量均显著升高（P＜0.01）,CIA小鼠中Treg细胞表达量很低（与空白组相比,P＜0.01）;同样地,CIA组脾淋巴细胞IL-17A、RORγt、IL-23R、JAK2、STAT3 m RNA表达水平显著上升（P＜0.01）,而Foxp3 m RNA表达水平显著降低（P＜0.01）;MTX和nub IR组对IL-17A、RORγt、IL-23R、JAK2、STAT3 m RNA表达水平均有明显抑制作用（P＜0.01）,而Foxp3 m RNA表达中,nbuIR-M、nub IR-H组与CIA对照组比较显著升高（P＜0.01）。2、体外实验中,模型组经过诱导分化后,Th17细胞比率明显升高（P＜0.01）;药物组与CIA对照组相比,随着药物浓度的递增,药物对Th17细胞抑制率增高,即Th17细胞比率降低。IL-17A、RORγt、IL-23R、JAK2、STAT3 m RNA表达水平中,与模型组相比,各组均有不同程度降低。结论:nbuIR可能通过抑制IL-23R/JAK2/STAT3轴的作用从而抑制Th17细胞分化增殖,促进了Treg细胞分化增殖,我们可以通过调控Th17与Treg细胞的平衡来调控机体免疫功能。
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