目的：急、慢性缺氧引发的缺氧性肺血管收缩是机体重要的自身调节机制，具有重要的生理和病理学意义。一方面它使通气不足的肺组织内动脉收缩、血流减少，有利于使肺通气相对充足的肺组织血流增加，从而有利于维持血氧浓度；但是另外一方面持续的肺小动脉收缩，使肺小动脉肥大、纤维化，有此导致肺动脉高压，最终引起肺源性心脏病，心衰死亡。缺氧引起肺血管收缩的机制十分复杂，目前尚未完全阐明。本课题组的前期工作证实缺氧可诱导15-脂氧酶表达增加，从而催化花生四烯酸(arachidonic acid，AA)生成15-羟基二十碳四烯酸(15-HETE)，进而使缺氧组新生幼兔肺动脉环产生浓度依赖性收缩反应。但是15-脂氧酶有两种同工酶。究竟是何种15-脂氧酶同工酶参与或是否两种同工酶同时参与缺氧所致的肺血管收缩尚未阐明。因此本研究从多种角度出发，观察两种同工酶在正常和缺氧状态下的表达差异，进一步探讨15-脂氧酶同工酶在缺氧性肺血管收缩及其所致疾病中的作用，从而为临床治疗提供新思路和靶点。 方法：1、利用乏氧箱制作大鼠缺氧模型，显微手术器械分离肺动脉血管环。2、分别采用光镜，电镜分析缺氧所致肺动脉变化。3、缺氧诱导因子抗体分析缺氧变化。4、免疫组化方法测定15-脂氧酶同工酶在正常和缺氧情况下的表达和分布。5、原位杂交法观察缺氧对15-脂氧酶同工酶mRNA表达的影响。6、免疫电镜方法测定15-脂氧酶同工酶在正常和缺氧情况下亚细胞结构的分布。7、原代培养新生小牛肺动脉内皮细胞和平滑肌细胞，分别采用第Ⅷ因子相关抗原(Ⅷ-RAg)多抗以及α-actin抗体检测证明是否是内皮细胞和平滑肌细胞以及细胞纯度。细胞传代并冻存。8、细胞缺氧时段模型制作，并用缺氧诱导因子检测表达。9、免疫细胞化学方法测定两种同工酶在内皮细胞和平滑肌细胞于各缺氧时段表达差异。10、采用相应抗体通过Western blot方法检测15-脂氧酶同工酶肺动脉组织，细胞水平表达差异。11、RT-PCR法测定15-脂氧酶同工酶mRNA水平表达差异。12、Western blot及PCR结果用Quantity one软件测定条带密度。图片分析用病理图片分析系统(PIPS-2020)记录光密度(OD值)。实验结果以mean±SD表示，采用SPSS 11.5统计软件分析，组间差异采用ANOVA、Dunnett′s检验分析。P<0.05具有统计学意义。 结果：1、缺氧动物模型经光镜，电镜分析，肺动脉出现典型改变，肥厚，增生，内皮细胞活跃，促进平滑肌细胞合成。2、细胞培养经第Ⅷ因子相关抗原和α-actin抗体检测证明是内皮细胞和平滑肌细胞，而且纯度较高。 3、15-LO-1在正常对照组肺动脉有蛋白质的表达而15-LO-2在正常对照组蛋白质水平不表达。4、缺氧时15-LO-1蛋白质表达显著强于在正常对照中的表达。5、缺氧时15-LO-2在蛋白质水平表达，但15-LO-1蛋白质水平表达强于15-LO-2。6、15-LO-1，15-LO-2在正常对照组和慢性缺氧组均有mRNA水平的表达，而且在缺氧组中的表达高于对照组。7、15-LO-1主要通过内皮细胞表达，15-LO-2主要通过平滑肌细胞表达。8、15-LO-1的表达随着缺氧的时间增加而增加，8h表达高峰。15-LO-2的表达也随着缺氧的时间增加而增加，但其高峰出现晚于15-LO-1，在缺氧12h后达到高峰。9、HIF-1α在缺氧时显著上调，其高峰出现时间为缺氧8h。10、缺氧性肺血管收缩可以促使两种同工酶发生亚细胞重新分布。 结论：缺氧同时诱导15-LO-1，15-LO-2在肺动脉中表达增加，从而使二者在缺氧性肺血管收缩中发挥作用。其中15-LO-1为调节HPV的主要酶，而15-LO-2为重要的协同酶。15-LO-1，15-LO-2与HIF-1α可以共同调节HPV，促进肺血管重构从而形成肺动脉高压。