【摘 要】
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目的:探讨芦丁（Rutin）对脂肪组织“棕色化”的影响,及调控脂肪“棕色化”的AMPK通路机制,为治疗肥胖,改善代谢提供新的理论依据。方法:一、动物实验6周龄雄性C57BL/6小鼠分为标准饲料组（ND组,6只）、高脂饲料组（HFD组,6只）及含0.1%Rutin的高脂饲料组（HFD+Rutin组,6只）。12 w后1%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉。心脏穿刺取血,检测血浆代谢指标。分离腹股沟脂肪组织（iW
【基金项目】
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芦丁通过AMPK/mTOR通路调控脂肪组织褐变的机制研究（编号:201903D321219）,山西省重点研发项目；
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目的:探讨芦丁（Rutin）对脂肪组织“棕色化”的影响,及调控脂肪“棕色化”的AMPK通路机制,为治疗肥胖,改善代谢提供新的理论依据。方法:一、动物实验6周龄雄性C57BL/6小鼠分为标准饲料组（ND组,6只）、高脂饲料组（HFD组,6只）及含0.1%Rutin的高脂饲料组（HFD+Rutin组,6只）。12 w后1%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉。心脏穿刺取血,检测血浆代谢指标。分离腹股沟脂肪组织（iWAT）、附睾脂肪组织（eWAT）和棕色脂肪组织（BAT）,用于Western blot实验、RT-PCR实验,及形态学观测。二、体外实验于3T3-L1细胞分化成熟期,分别给予AMPK抑制剂CC、AMPK激动剂AICAR、CaMKKβ抑制剂STO-609、钙离子螯合剂BAPTA-AM与Rutin共培养。收集细胞用于检测能量消耗因子、成脂基因、脂质积累、线粒体膜电位等指标。结果:（1）与HFD组相比,Rutin干预可减轻肥胖小鼠体重、脂肪组织与肝脏重量（P＜0.05）;降低血浆代谢指数（P＜0.05）;减小脂肪细胞体积;增加能量消耗标记物与P-AMPK含量（P＜0.05）;抑制WAT成脂基因表达（P＜0.05）;提高BAT成脂基因 AP2 表达（P＜0.05）。（2）Rutin可促进3T3-L1细胞能量消耗标记物与P-AMPK表达（P＜0.001）,降低成脂基因表达（P＜0.05）,减少脂滴积累及增高线粒体膜电位。（3）Rutin组抑制AMPK,3T3-L1细胞能量消耗标记物与P-AMPK表达减少（P＜0.05）。活化AMPK,能量消耗标记物与P-AMPK 比 Rutin组表达增加（P＜0.05）。（4）Rutin干预可增加Hela细胞Ucp-1、P-AMPK表达（P＜0.01）。CaMKKβ抑制剂STO-609处理3T3-L1细胞,细胞能量消耗标记物与P-AMPK表达减少（P＜0.05）。钙离子螯合剂BAPTA-AM处理3T3-L1细胞,能量消耗标记物与P-AMPK 比 Rutin组表达降低（P＜0.05）。结论:（1）Rutin改善高脂饮食诱导的血脂代谢紊乱、肥胖和非酒精性脂肪肝病。（2）Rutin促进脂肪“棕色化”,进而肥胖等改善代谢紊乱。（3）Rutin促进WAT“棕色化”和BAT活化,其机制与激活CaMKKβ-AMPK通路相关。
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