【摘 要】
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目的:本研究观察敦煌医学《灸经图》重灸疗法对类风湿关节炎模型大鼠血清及滑膜中IL-1、IL-6、TNF-α的水平,探讨分析敦煌医学《灸经图》重灸疗法治疗类风湿关节炎的作用机制。方法:将40只SPF级SD大鼠,按随机数字表法随机分为空白组、模型组、西药组、艾灸组、重灸组,每组8只。造模采用Ⅱ型胶原诱导加风寒湿环境结合的方法。干预措施:空白组和模型组正常喂养,同时做抓取固定;西药组腹腔注射甲氨蝶呤,剂
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目的:本研究观察敦煌医学《灸经图》重灸疗法对类风湿关节炎模型大鼠血清及滑膜中IL-1、IL-6、TNF-α的水平,探讨分析敦煌医学《灸经图》重灸疗法治疗类风湿关节炎的作用机制。方法:将40只SPF级SD大鼠,按随机数字表法随机分为空白组、模型组、西药组、艾灸组、重灸组,每组8只。造模采用Ⅱ型胶原诱导加风寒湿环境结合的方法。干预措施:空白组和模型组正常喂养,同时做抓取固定;西药组腹腔注射甲氨蝶呤,剂量为0.1mg/100g,5d注射一次;艾灸组选择双侧“肾俞”、“足三里”给予温和灸,每穴灸20min,每日1次,重灸组选穴与艾灸组相同,每穴灸40min,每日2次,共艾灸10d。在实验过程中观察大鼠的一般状况,并于造模前后及治疗后,观察和测量各组大鼠的左踝关节直径、关节炎指数。取材前禁食24h,麻醉大鼠后心脏负压采血分离血清,处死后取大鼠踝关节滑膜,采用ELISA检测血清中IL-1、IL-6、TNF-α的含量,用HE染色观察模型大鼠滑膜组织的炎性浸润,免疫组化检测大鼠滑膜组织IL-1、IL-6、TNF-α的表达。结果:1.一般情况:空白组大鼠进食水量正常,反应灵敏,毛发光泽,大小便正常,体重明显增加;其余四组大鼠从造模第2天开始出现踝关节肿胀,进食水量逐渐减少,反应迟钝,毛发暗黄、无光泽,体重增加缓慢,加强免疫后大鼠双下肢肿胀明显,跛行明显,皮色紫红。各治疗组经治疗后,大鼠关节肿胀度减轻,反应的灵敏度、毛发光泽度均有一定程度的改善,其中重灸组改善最为明显。2.踝关节直径:造模前,各组大鼠踝关节直径无显著性差异（P＞0.05）。造模后,与空白组比较,模型组、西药组、艾灸组、重灸组大鼠踝关节直径增大（P＜0.05）,提示造模成功。模型组、西药组、艾灸组、重灸组两两比较（P＞0.05）,基线可比。干预后,与模型组比较,西药组、艾灸组、重灸组大鼠踝关节直径均变小,差异有统计学意义（P＜0.05）。与西药组比较,重灸组踝关节直径变小（P＜0.05）。与艾灸组比较,重灸组踝关节直径变小,差异有统计学意义（P＜0.05）。3.关节炎指数:造模后,各组大鼠AI评分均＞8分,说明RA模型造模成功。治疗后,与模型组比较,西药组、艾灸组、重灸组大鼠AI评分均下降,差异具有统计学意义（P＜0.05）。与西药组比较,重灸组AI评分下降（P＜0.05）。与艾灸组比较,重灸组AI评分下降,差异有统计学意义（P＜0.05）。4.踝关节滑膜病理形态学:空白组大鼠踝关节滑膜组织结构正常,可见各组织形态清晰,无组织坏死、炎性细胞浸润,滑膜细胞平整有序,未见滑膜细胞肿胀,无纤维组织增生,无血管翳形成。模型组可见大量炎性细胞浸润,滑膜增生,伴血管翳形成,可见组织变性坏死。西药组、艾灸组、重灸组经治疗后大鼠踝关节滑膜组织结构均有所改善,可见少量滑膜炎性细胞浸润,轻度水肿,未见组织坏死、血管翳形成。5.大鼠血清IL-1、IL-6和TNF-α水平:与空白组比较,模型组大鼠血清IL-1、IL-6和TNF-α含量升高（P＜0.05）。与模型组比较,西药组、艾灸组和重灸组大鼠血清IL-1、IL-6和TNF-α含量下降（P＜0.05）。与西药组比较,重灸组IL-1、IL-6、TNF-α含量升高,差异无统计学意义（P＞0.05）。与艾灸组比较,重灸组IL-1、IL-6和TNF-α含量下降,差异有统计学意义（P＜0.05）。6.大鼠踝关节滑膜IL-1、IL-6和TNF-α表达量:与空白组比较,模型组大鼠滑膜IL-1、IL-6和TNF-α含量升高（P＜0.05）。与模型组比较,西药组、艾灸组和重灸组大鼠滑膜IL-1、IL-6和TNF-α含量下降（P＜0.05）。与西药组比较,重灸组IL-1、IL-6和TNF-α含量上升,差异无统计学意义（P＞0.05）。与艾灸组比较,重灸组IL-1和IL-6含量降低差异有统计学意义（P＜0.05）;TNF-α含量降低,但差异无统计学意义（P＞0.05）。结论:1.西药、普通艾灸和敦煌医学《灸经图》重灸均能改善RA模型大鼠一般情况,减轻踝关节肿胀,降低关节炎指数,且敦煌医学《灸经图》重灸疗法效果优于西药与普通艾灸;2.敦煌医学《灸经图》重灸疗法能够降低RA模型大鼠血清和滑膜中IL-1、IL-6和T NF-α的水平,效果与西药相当;在降低血清和滑膜中IL-1和IL-6的水平上优于普通艾灸;3.敦煌医学《灸经图》重灸疗法效果优于普通艾灸,表明艾灸量效关系对RA模型大鼠炎症因子的表达有显著影响,重灸能抑制炎症因子IL-1、IL-6和TNF-α的表达而发挥其作用机制,这为临床应用重灸疗法治疗类风湿关节炎提供了可靠的实验依据。
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