随着全球人均寿命的持续增长,人口老龄化问题日益凸显。出于对美的追求和对衰老皮肤疾病的预防,人们对具有抗衰老功能的化妆品产生了巨大的需求。藏药五脉绿绒蒿应用历史悠久,已被多项研究证明具有抗氧化、抗菌消炎和抗肿瘤等生物活性,但其潜在的抗衰老美容功效还未见报道。冰川水虽然已被多次应用于美容护肤品领域,但是其作用机制还不清楚。因此,本研究以体外培养的成人成纤维细胞(HDF-a)为细胞模型,初步探究了来自喜马拉雅山脉的天然冰川水和五脉绿绒蒿提取物两种天然成分对HDF-a的作用,旨在揭示冰川水和五脉绿绒蒿提取物能否延缓甚至逆转HDF-a的衰老并初步探讨其作用机制,为其作为活性成分添加至化妆品中提供科学依据。首先,通过细胞毒性实验筛选出五脉绿绒蒿提取物在超纯水和冰川水中促进HDF-a增殖的适宜浓度。随后从细胞活性、细胞外基质表达水平和细胞周期三个方面探究冰川水、提取物及组合物对HDF-a的作用。细胞毒性实验结果提示,冰川水和五脉绿绒蒿提取物能够促进HDF-a增殖并加强HDF-a的能量供应,提高细胞活性。两者组合时,提高细胞活性更加明显。在蛋白水平上,提取物能够促进弹性蛋白和I型胶原蛋白的表达;冰川水能够上调弹性蛋白的表达,对I型胶原蛋白则无明显作用;组合物促进两种蛋白表达的效果优于两种物质单独作用;真皮中的透明质酸的含量也受冰川水和提取物的影响,两者都可以提高细胞外基质中的透明质酸浓度且组合物作用更明显。在转录水平上,提取物可以抑制Elastase的表达而减缓弹性蛋白的水解,冰川水无此作用。但是,冰川水和提取物并没有通过下调MMP-1和HYAL1的转录水平来调节I型胶原蛋白和透明质酸的分解代谢。细胞周期结果提示,冰川水和五脉绿绒蒿提取物能够促进HDF-a通过G1/S检验点进入S和G2/M期,促进细胞分裂与增殖,组合物对周期的调节作用更加明显。经冰川水和五脉绿绒蒿提取物处理后,原癌基因cMyc、c-Fos和生长因子受体EGFR在转录水平表达上调而衰老通路基因p21的转录表达水平受到抑制。综上所述,本研究初步揭示了五脉绿绒蒿提取物对HDF-a的作用,即调节细胞周期,提高细胞活性;同时,调节细胞外基质成分的代谢,提高皮肤中I型胶原蛋白、弹性蛋白和透明质酸的含量。冰川水对HDFa具有相似的作用,但效果不如五脉绿绒蒿提取物明显。两者组合时对HDF-a的作用效果优于单独处理,提示两者的作用机制间存在一定的协同效应。